Valeur diagnostique de la détermination de l'urée dans le sérum sanguin. Dosage de l'urée dans le sérum sanguin par réaction colorée avec la diacétyle monooxime

L'urée est le principal produit de dégradation des protéines. C’est la forme chimique sous laquelle l’azote dont le corps n’a pas besoin est éliminé par l’urine.

L'accumulation d'urée et d'autres composés azotés dans le sang due à une insuffisance rénale conduit à l'urémie.

Synonymes russe

Diamide d'acide carbonique, urée, urée dans le sang.

SynonymesAnglais

Azote uréique, urée, azote uréique sanguin (BUN), urée, urée plasmatique.

Méthode de recherche

Test cinétique UV.

Unités de mesure

mmol/l (millimoles par litre).

Quel biomatériau peut-on utiliser pour la recherche ?

Sang veineux et capillaire.

Comment bien se préparer à la recherche ?

• Ne mangez pas 12 heures avant le test.
• Évitez le stress physique et émotionnel et ne fumez pas 30 minutes avant de donner votre sang.

Informations générales sur l'étude

L'urée est l'un des produits finaux du métabolisme des protéines, contenant de l'azote. Il est produit dans le foie, transporté par le sang jusqu'aux reins, où il est filtré à travers le glomérule puis excrété. Le résultat du test d'urée est un indicateur de la production glomérulaire et de l'excrétion urinaire.

L'azote métabolisé se trouve dans l'organisme sous forme d'ammoniac, produit à partir des restes de dégradation et de transformation des protéines. L'ammoniac présent dans le foie se combine avec le dioxyde de carbone pour former de l'urée. La dégradation rapide des protéines et les lésions rénales augmentent rapidement les taux d'urée dans le sang (comme le fait pratiquement toute mort cellulaire massive).

La quantité d'urée sécrétée dépend directement du niveau de protéines consommée par une personne ; elle augmente en cas de fièvre, de complications du diabète et d'augmentation de la fonction hormonale des glandes surrénales. Des niveaux élevés d’urée sont un marqueur d’une diminution de la filtration glomérulaire.

L'urée est l'un des principaux métabolites du sang ; le corps ne l'utilise pas, mais s'en débarrasse seulement. Ce processus d’excrétion étant continu, une certaine quantité d’urée se trouve toujours dans le sang.

Le taux d'urée doit être interprété de manière indissociable des valeurs de créatinine. Le terme « urémie » est utilisé lorsque la concentration d’urée dans le sang dépasse 20 mmol/l.

L'azotémie, également indiquée par une augmentation de la concentration d'urée, est le plus souvent la conséquence d'une excrétion insuffisante due à une maladie rénale.

Les taux d'urée dans le sang diminuent dans de nombreuses maladies du foie. Cela est dû à l'incapacité des cellules hépatiques endommagées à synthétiser l'urée, ce qui entraîne une augmentation des concentrations d'ammoniac dans le sang et le développement d'une encéphalopathie hépatique.

L'insuffisance rénale survient lorsque le glomérule perd sa capacité à filtrer les métabolites sanguins à travers lui-même. Cela peut survenir soudainement (insuffisance rénale aiguë) en réponse à une maladie, à l'administration de médicaments, de poisons ou à une blessure. Parfois, cela est une conséquence de maladies rénales chroniques (pyélonéphrite, glomérulonéphrite, amylose, tumeurs rénales, etc.) et d'autres organes (diabète, hypertension, etc.).

Un test d'urée est généralement prescrit en combinaison avec un test de créatinine.

A quoi sert la recherche ?

• Évaluer la fonction rénale dans diverses conditions (en conjonction avec un test de créatinine).
• Pour le diagnostic des maladies rénales et pour vérifier l'état des patients atteints d'insuffisance rénale chronique ou aiguë.

Quand est prévue l’étude ?

• L'urée est testée lors d'une étude biochimique :
  • pour les plaintes non spécifiques,
  • lors de l'évaluation de la fonction rénale avant de prescrire un traitement médicamenteux,
  • avant l'hospitalisation d'un patient en raison d'une maladie aiguë,
  • lorsqu'une personne est hospitalisée.
• Pour les symptômes de dysfonctionnement rénal :
  • faiblesse, fatigue, diminution de l'attention, manque d'appétit, problèmes de sommeil,
  • gonflement du visage, des poignets, des chevilles, ascite,
  • urine mousseuse, rouge ou couleur café
  • diminution de la diurèse,
  • problèmes de miction (brûlures, intermittence, prédominance de diurèse nocturne,
  • douleur dans la région lombaire (surtout sur les côtés de la colonne vertébrale), sous les côtes,
  • hypertension artérielle.
• De plus, cette analyse peut être réalisée périodiquement :
  • pour vérifier l'état des patients atteints d'insuffisance rénale chronique ou de maladies chroniques non rénales telles que le diabète, l'insuffisance cardiaque congestive, l'infarctus du myocarde, l'hypertension artérielle, etc.,
  • avant et pendant le traitement médicamenteux pour déterminer l'état de la fonction rénale,
  • après les séances de dialyse pour évaluer leur efficacité.

Que signifient les résultats ?

Valeurs de référence

Âge, sexe		Valeurs de référence
		1,8 - 6 mmol/l
		2,5 - 6 mmol/l
		2,9 - 7,5 mmol/l
20 – 50 ans		3,2 - 7,3 mmol/l
		2,6 - 6,7 mmol/l
		3 - 9,2 mmol/l
		3,5 - 7,2 mmol/l

Raisons de l'augmentation des niveaux d'urée :

• diminution de la fonction rénale provoquée par une insuffisance cardiaque congestive, une perte de sels et de liquides, un choc associé à un catabolisme protéique excessif (hémorragie gastro-intestinale, infarctus aigu du myocarde, stress, brûlures),
• maladie rénale chronique (pyélonéphrite, glomérulonéphrite, amylose, tuberculose rénale, etc.),
• obstruction des voies urinaires (tumeur de la vessie, adénome de la prostate, lithiase urinaire, etc.),
• saignements du tractus gastro-intestinal supérieur (ulcère gastroduodénal de l'estomac, du duodénum, ​​cancer de l'estomac, du duodénum, ​​etc.),
• diabète sucré avec acidocétose,
• augmentation du catabolisme des protéines dans le cancer,
• prise de corticostéroïdes, de médicaments néphrotoxiques, de tétracyclines, d'excès de thyroxine,
• utilisation de stéroïdes anabolisants,
• aliments riches en protéines (viande, poisson, œufs, fromage, fromage blanc).

Raisons des faibles niveaux d’urée :

• insuffisance hépatique, certaines maladies du foie : hépatite, cirrhose, hépatodystrophie aiguë, tumeurs du foie, coma hépatique, intoxication par des poisons hépatotoxiques, surdosage médicamenteux (cela perturbe la synthèse de l'urée),
• acromégalie (une maladie hormonale caractérisée par une production accrue d'hormone somatotrope),
• jeûne, régime pauvre en protéines,
• altération de l'absorption intestinale (malabsorption), par exemple en cas de maladie coeliaque,
• syndrome néphrotique (augmentation de l'excrétion de protéines dans les urines, hyperlipidémie, diminution des taux de protéines dans le sang),
• augmentation de la production d'hormone antidiurétique (ADH) et, par conséquent, hypervolémie pathologique,
• grossesse (une synthèse accrue des protéines et une filtration rénale accrue entraînent une diminution de la quantité d'urée chez la femme enceinte).

Qu'est-ce qui peut influencer le résultat ?

Le principe de la méthode repose sur la détermination de la quantité d'ammoniac libérée lors de la décomposition de l'urée dans le sérum ou le sang total sous l'action de l'uréase, à l'aide d'une méthode colorimétrique utilisant la méthode de Nessler.

Une augmentation de la concentration d'urée, qui se produit en cas de lésions rénales chroniques, de dégradation accrue des protéines dans les tissus, d'obstruction intestinale et de blocage des voies urinaires, a une signification diagnostique. Une diminution des niveaux d'urée se produit pendant le jeûne, un régime sans protéines et des défauts enzymatiques dans la formation de l'urée.

Créatine et créatinine. Détermination quantitative de la créatinine, rôle,

Valeur diagnostique.

Créatine- un acide carboxylique azoté présent dans le corps des vertébrés. Participe au métabolisme énergétique des cellules musculaires et nerveuses.

Créatinine- le produit final de la réaction créatine phosphate. La créatinine est formée dans les muscles puis libérée dans le sang. La créatinine est impliquée dans le métabolisme énergétique des muscles et d'autres tissus. La créatinine est excrétée par les reins dans l'urine. La créatinine (sa quantité dans le sang) est donc un indicateur important de l'activité rénale.

Le principe de la méthode repose sur la capacité de la créatinine à réagir en milieu alcalin avec l'acide pyrique pour former des produits de couleur orange. L'intensité de la coloration en développement est proportionnelle à la quantité de créatinine.

Valeur diagnostique : la teneur en créatinine dans le sérum sanguin augmente fortement en cas d'insuffisance rénale, d'insuffisance cardiaque congestive, d'acromégalie et d'excès de protéines animales dans l'alimentation.

39. Commande programmée–3 : connaître les formules : FAFS, UDFGK

(étendu); chimie des réactions de neutralisation de l'ammoniac en place

formation, synthèse d'urée et de créatinine, chimie de formation

sels d'ammonium, moyens de transport de l'ammoniac, neutralisation

amines biogènes.

FAFS ET UDFGK.

Mécanismes de décontamination en place.

Synthèse d'urée.

Synthèse de créatine.

Créatinine:

Réactifs. Réactif colorant* ; urée, solution étalon 1 g/l, soit 16,65 mmol/l ; Ensemble "Ureatest".

Équipement. Rack avec tubes à essai ; pipettes d'une capacité de 0,1, 2 et 5 ml ; papier d'aluminium; bain-marie; FEC.

Matériel.

Sérum sanguin.

Urine collectée par jour, filtrée et diluée 25 fois avec de l'eau avant analyse.

UN. Détermination de la teneur en urée dans le sérum sanguin. La méthode est basée sur la capacité de l'urée, en présence de thiosemicarbazide et de sels de fer dans un milieu fortement acide, à former un composé rouge avec la diacétylmonoxime dont l'intensité colorée est proportionnelle à la teneur en urée du liquide testé.

Progrès de la détermination. 0,1 ml de sérum sanguin dilué 10 fois est mesuré dans le tube à essai, le même volume de solution étalon d'urée dans le tube étalon et 0,1 ml d'eau distillée dans le tube témoin. Ajouter 2 ml de réactif coloré dans tous les tubes à essai et bien mélanger leur contenu en agitant.

Tous les tubes sont recouverts de papier d'aluminium et chauffés dans un bain-marie bouillant pendant 10 minutes ( exactement! ). Refroidissez-les ensuite sous l’eau froide courante.

L'extinction des échantillons standard et expérimentaux par rapport à l'échantillon témoin est mesurée sur FEC à 540-560 nm (filtre vert) dans une cuvette d'une épaisseur de couche de 0,5 cm.

Note . La couleur est instable, la mesure doit donc être effectuée dans les 15 minutes.

Calcul. La teneur en urée x (mmol/l) dans le sérum sanguin est calculée à l'aide de la formule

Mi op 16.65∙10

où E op est l'extinction de l'échantillon expérimental par rapport à l'échantillon témoin ;

E st – extinction d'un échantillon standard par rapport à un échantillon témoin ;

16,65 – concentration d'urée dans un échantillon standard, mmol ;

L'azote de l'urée (en mmol/l) est calculé en divisant la teneur en urée sérique résultante par 2,14 (un nombre exprimant le rapport entre le poids moléculaire de l'azote de l'urée et le poids de la molécule d'urée entière).

b . Détermination de la teneur en urée dans l'urine. Le principe de la méthode est le même que dans le travail précédent.

Progrès de la détermination. Pour l'analyse, utilisez 0,1 ml d'urine diluée et 0,1 ml de solution étalon d'urée et traitez ces échantillons de la même manière que le sérum sanguin.

Calcul effectué selon la formule

E sur V25∙1.665

Est 0,1∙1000

où x est la quantité d'urée, mmol/jour ;

V – volume d'urine quotidienne ;

E op – extinction de l'expérience ;

E st – extinction de la norme ;

0,1 – volume d'urine prélevé pour examen, ml ;

1000 – facteur de conversion µmol en mmol.

V. Détermination de la teneur en urée dans le sérum sanguin par la méthode express à l'aide du kit Ureatest. La méthode est basée sur la capacité de l’uréase à décomposer l’urée pour former de l’ammoniac, ce qui rend une bande de papier de chromatographie réactif bleue. La hauteur de la zone colorée est proportionnelle à la concentration en urée, calculée à partir du graphique d'étalonnage.

Progrès de la détermination. Le sérum sanguin est dilué avec de l'eau dans un rapport de 1:1. 0,03 ml de sérum sanguin dilué est appliqué avec une pipette spéciale à l'extrémité de la bandelette de papier imbibée d'enzyme, à 3 mm de la bandelette de paraffine rouge. La bandelette est immédiatement placée dans un tube à essai propre et sec, fermé hermétiquement par un bouchon et placé dans un thermostat à 37°C. Après 20 minutes, la bandelette est retirée et la hauteur de la zone colorée en bleu est mesurée.

Calcul. A l'aide de la courbe d'étalonnage incluse dans le kit Ureatest, on détermine la concentration d'urée dans le sérum sanguin.

Enregistrement des travaux. Calculez la teneur en urée et en azote de l'urée dans le sérum et l'urine testés. En conclusion, notons les changements possibles dans le métabolisme de l'azote.

Importance pratique du travail. Normalement, la teneur en urée dans le sérum sanguin humain est de 3,0 à 7,0 mmol/l et l'urée en azote est de 1,2 à 3,7 mmol/l. La teneur en urée dans le sérum sanguin varie considérablement en fonction de l'apport en protéines avec les aliments. Une augmentation du taux d'urée dans le sang (azotémie) est observée en cas de maladie rénale (lorsque leur fonction excrétrice est altérée), avec une dégradation accrue des protéines, une nutrition excessive en protéines, ainsi qu'en cas de déshydratation du corps. (dans ce cas, il existe une forme relative et non absolue d'azotémie). Une diminution du taux d'urée dans le sang et de son excrétion dans l'urine (normalement 333 à 582,8 mmol/jour sont excrétés par jour) est observée dans les maladies du foie (ictère parenchymateux, dystrophie hépatique, cirrhose), qui est associée à une violation de la fonction formatrice d'urée.

Travail 60. Détermination de la concentration d'urée dans le sérum sanguin et l'urine

Avec l'urine, un adulte excrète 20 à 35 g, soit 333 à 583 mmol d'urée par jour. L'urée est un diamide d'acide carbonique formé dans le foie lors de la neutralisation de l'ammoniac. Normalement, le sérum sanguin contient 3,33 à 8,32 mmol/l d'urée.

Principe de la méthode. L'urée forme des composés colorés avec la diacétyle monooxime en présence de thiosemicarbazide et de sels de fer dans un environnement acide. L'intensité de la couleur est directement proportionnelle à la concentration d'urée dans l'urine et le sérum sanguin testés et est déterminée par photométrie.

Matériel à l'étude: sérum sanguin, urine.

Réactifs : solution étalon d'urée (16,7 mmol/l). Solution de chlorure ferrique à 5 % (solution mère : 5 g de chlorure ferrique sont portés à 100 ml avec de l'eau, puis acidifiés avec 1 ml de H 2 SO 4 concentré ; la solution de travail est préparée à partir de la solution mère : 1 ml de la solution mère la solution est portée à un volume de 100 ml avec de l'eau distillée, ajouter 8 ml de H 2 SO 4 concentré et 1 ml d'acide orthophosphorique à 85 % ; la solution est conservée dans un récipient sombre). Solution aqueuse à 2,5 % de diacétylmoxime, solution à 0,25 % de thiosemicarbazide (conservée dans un récipient sombre). Réactif chlorure coloré (préparé à chaque fois avant utilisation) : ajouter 20 ml d'eau distillée, 1 ml de diacétylmoxime à 2,5% et 0,25 ml de thiasemicarbazide à 0,25% à 30 ml de solution de travail de chlorure ferrique).

Équipement: pipettes, tubes à essai, FEC, cuvettes à longueur optique

chemin 5 mm.

AVANCEMENT DES TRAVAUX. Avant la détermination, diluez l'urine 10 fois. Ajoutez 0,1 ml d'urine dans un tube à essai, 0,1 ml de sérum sanguin dans un autre et une solution standard d'urée dans le troisième. Ensuite, 2 ml de solution de travail pour déterminer l'urée sont ajoutés aux 3 tubes à essai, mélangés et placés dans un bain-marie bouillant pendant 10 minutes. Ensuite, les tubes à essai sont refroidis dans un courant d'eau froide et colorimétriques à l'aide d'un filtre vert dans une cuvette d'un trajet optique de 5 mm contre l'eau.

Le calcul se fait à l'aide de la formule :

167E op/E st (pour l'urine).

Une teneur réduite en urée dans l'urine est observée en cas de néphrite, d'acidose, d'ictère parenchymateux, de cirrhose du foie, d'urémie, et une teneur accrue en cas de manque de protéines dans l'alimentation, d'anémie pernicieuse, de fièvre, de dégradation intensive des protéines dans l'organisme. , après la prise de salicylates, et en cas d'intoxication au phosphore.

Méthode à l'uréase pour déterminer l'urée

L'urée est la fraction principale de l'azote résiduel dont le dosage est utilisé à des fins de diagnostic. Sa synthèse se produit dans le foie à partir de l'ammoniac, qui se forme lors de la désamination des acides aminés et de la dégradation des nucléotides puriques et pyrimidines.

Les écarts par rapport à la teneur normale en urée dans le sérum sanguin dépendent de la vitesse des processus de synthèse de l'urée et de son excrétion. Une augmentation de la teneur en urée dans le sérum sanguin est l'un des principaux signes d'une maladie rénale. Parmi les fractions d'azote résiduel, la teneur en urée augmente en premier. En cas d'insuffisance rénale, l'azote uréique peut représenter jusqu'à 90 % des fractions azotées résiduelles.

Une augmentation du taux d'urée dans le sérum sanguin peut également être de nature extrahépatique : avec perte de liquide, avec dégradation accrue des protéines (atrophie hépatique aiguë, insuffisance hépatique sévère) en raison d'une altération de la synthèse de l'urée dans le foie.

Principe de la méthode : L'urée se décompose sous l'action de l'uréase pour former de l'ammoniac et du dioxyde de carbone. Pour l’uréase, l’urée est le seul substrat, les méthodes à l’uréase sont donc très spécifiques. L'ammoniac libéré forme un produit coloré avec de l'hypochlorite de sodium et du phénol-indophénol (bleu). L'intensité de la couleur est proportionnelle à la teneur en urée.

Réactifs :

2. Éthylènediamine-N (sel disodique de l'acide N-tétraacétique).

3 EDTA – tampon pH 6,5 : 0,6 g de Trilon B est dissous dans 30 à 40 ml d'eau, ajusté à pH 6,5 avec une solution d'hydroxyde de sodium et ajouté avec de l'eau jusqu'à 50 ml.

4. Solution mère d'uréase en tampon : 20 mg d'uréase sont dissous dans 10 ml de tampon.

5. Solution de travail d'uréase - avant de commencer la détermination, prélevez la quantité requise de la solution principale et diluez-la avec de l'eau bidistillée dans un rapport de 1:4.

7. Nitroprussiate de sodium 2-eau.

8. Réactif colorant : phénol - 0,11 mol/l, nitroprussiate de sodium - 0,18 mol/l : Dans une fiole jaugée de 500 ml, on place 0,0263 g de nitroprussiate de sodium, ajoute environ 300 ml d'eau dissous sous agitation. Ajoutez ensuite 5,18 g de phénol et ajoutez de l'eau jusqu'au trait.

9. Soude caustique 1 mol/l ; 0,26 mole/l.

10. Hypochlorure de sodium : 10 g d'eau de Javel sont agités pendant 15 minutes avec 17 ml d'eau, puis une solution composée de 17 ml d'eau et 7 g de carbonate de sodium est ajoutée. La masse s'épaissit d'abord puis se liquéfie. Le liquide surnageant est égoutté et filtré sur un filtre à eau lavé. Dès que la solution acquiert une légère couleur jaune, ajoutez 10 gouttes d'une solution d'amidon à 1 % et titrez jusqu'à décoloration.

11. La solution principale d'hypochlorite de sodium est diluée avec de l'eau pour que la concentration en chlore soit de 0,78 g/l, mélangée à un volume égal de solution d'hydroxyde de sodium à 0,26 mol/l (100 ml + 100 ml).

12. Urée.

13. Acide benzoïque, 2 g/l (l'acide est dissous lorsqu'il est chauffé).

14. Solution d'étalonnage d'urée, 0,5 mmol/L : Dissoudre 15 mg d'urée dans une fiole jaugée de 500 ml dans une solution d'acide benzoïque à 2 g/L.

Progression de la détermination : Avant la détermination, le sérum est dilué avec une solution de chlorure de sodium à 0,154 mol/l dans un rapport de 1:9.

Échantillon expérimental : 100 µl de solution de travail d'uréase sont ajoutés dans un tube à essai, 20 µl de sérum dilué sont ajoutés. Boucher, mélanger et incuber 15 minutes à 37 °C. Après incubation, ajouter 300 μl de réactif coloré et 300 μl de solution de travail d'hypochlorite de sodium. Mélanger et incuber pendant 20 à 30 minutes à 37 °C. L'extinction est mesurée dans une cuvette d'une épaisseur de couche de 1 cm à une longueur d'onde de 500 à 560 nm (filtre vert) par rapport à un échantillon blanc.

L'échantillon à blanc est traité de la même manière que l'échantillon expérimental, mais à la place du sérum, une solution à 0,154 mol/l est prélevée.

L'échantillon d'étalonnage est traité de la même manière que l'échantillon expérimental, mais à la place du sérum, une solution d'étalonnage d'urée est prélevée. Mesurez dans les mêmes conditions sur un échantillon à blanc.

Le calcul s'effectue selon la formule :

Quantité d'urée, mmol/l = -------- x 0,5 x 10

Où E oo est l'extinction de l'échantillon à tester, E k est l'extinction de l'échantillon d'étalonnage : 0,5 est la concentration d'urée dans la solution d'étalonnage mmol/l, 10 est le facteur de dilution.

Valeurs normales. Sérum sanguin – 2,5-8,3 mmol/l ou 20-50 mg/100 ml.

Dosage quantitatif de l'urée dans le sérum sanguin.................................................. ......... ............................................Page 10

Travail de laboratoire n°15

Dosage quantitatif de la vitamine C dans le sérum sanguin.................................................. ....................................................................... page 11

Travail de laboratoire n°16

Détermination de la teneur en vitamine C dans l'urine.................................................. ........................................................ ............... ...................Page 11

Travail de laboratoire n°17

Test de coagulation Veltman............................................................ ..................................................... ........................................................page 12

Travail de laboratoire n°18

Dosage de l'hémoglobine totale par dénaturation alcaline............................................... .......................................page 12

Travail de laboratoire n°19

Détermination de la bilirubine par la méthode Jedrašek................................................. ........................................................ ............... ..............page 13

Travail de laboratoire n°20

Dosage du calcium, du phosphore dans le sérum sanguin par méthode titrométrique

avec l'utilisation de murexide............................................................ ....................................................... ............ ....................................... ..................page 14

Travail de laboratoire n°21

Réactions qualitatives aux composants inorganiques et organiques de l'urine.................................................. ........... ......page 14

Travail de laboratoire n°22

Dosage des protéines salivaires par la méthode du biuret............................................ ....................................................................... ............ .........page 15

Travail de laboratoire n°1

Détermination quantitative de l’activité amylase salivaire.................................................. ........................................................ .....page 16

Travail de laboratoire n°2

Détermination de l'activité de la phosphatase alcaline salivaire............................................ ........................ .......................... ................................page 16

Travail de laboratoire n°3

Détermination de l'activité transaminase de la salive.................................................. ........................................................ ............ ......page 17

Travail de laboratoire n°4

Dosage du calcium dans la salive par la méthode titrimétrique au murexide............................................... ........page 18

Règles pour travailler au KFK-2

1. Branchez le calorimètre dans les 15 minutes. avant de commencer les mesures. Pendant le chauffage, le compartiment des cuvettes doit être ouvert (dans ce cas, le rideau devant les photodétecteurs bloque le faisceau lumineux).

2. Installez le filtre requis. Lors du changement des filtres de lumière, le bouton « sensibilité » doit être en position « 1 » (filtre de lumière rouge 670- « 1 », filtre de lumière verte 540- « 1 ») et le bouton « set 100 Coarse » doit être à l'extrême. position gauche (cela protège l'appareil contre la surcharge et les dommages).

3. Placez une cuvette avec une solution de contrôle par rapport à laquelle les mesures sont effectuées dans le flux lumineux.

4. Placez une cuvette contenant la solution de test dans la deuxième cellule du porte-cuvette.

5. Fermez le couvercle du compartiment à cuvettes.

6. Le bouton SENSIBILITÉ et le RÉGLAGE 100 d'abord BRUT, puis FINE, règlent la lecture à 100 sur l'échelle du calorimètre.

7. En tournant la poignée sous le compartiment à cuvettes jusqu'à ce qu'elle s'arrête, insérez la cuvette contenant la solution de test dans le flux lumineux.

8. Prenez une lecture sur l'échelle D en unités de densité optique.

Leçon n°30 Travail n°1. Dosage de l'urée dans le sérum sanguin (méthode au diacétyle monooxime)

L'urée est un produit formé dans le foie lors de la neutralisation de l'ammoniac. L'urée est le principal produit final du métabolisme des protéines. Environ 50 % de l’azote résiduel non protéique présent dans le sang est de l’urée.

PRINCIPE DE LA MÉTHODE : l'urée forme un composé complexe rouge avec la diacétyle monooxime dans un environnement fortement acide en présence de thiosemicarbazide et d'ions ferriques, dont l'intensité de la couleur détermine sa concentration.

PROGRÈS: prenez trois tubes à essai : expérience, étalon, contrôle.

Placer tous les tubes à essai dans un bain-marie à 100°C pendant 5 minutes.

Refroidir et mesurer l'extinction par rapport au contrôle à 500-560 nm ; cuvette 10 mm. Les mesures sont effectuées dans un délai de 15 minutes.

RÉSULTAT:

RÉSULTAT FINAL : calculé par la formule :

X = ----- x 16,65 = mmol/l

où X est la concentration d’urée, mmol/l.

A 1 - extinction de l'échantillon expérimental (Exo).

A 2 - extinction de l'échantillon standard (Ex st.).

CALCUL:

VALEUR DIAGNOSTIQUE CLINIQUE.

La teneur normale en urée dans le sérum sanguin chez l'adulte est de 2,5 à 8,32 mmol/l ; dans l'urine 333 - 582 mmol/jour.

Une légère augmentation de la concentration d'urée dans le sérum sanguin est observée avec une alimentation excessive en aliments protéinés et avec le vieillissement.

Une augmentation significative de la concentration d'urée dans le sérum sanguin (urémie) est observée en cas d'insuffisance rénale, de déshydratation (vomissements, diarrhée), de choc, de dégradation accrue des protéines et de septicémie.

Une teneur réduite en urée dans le sérum sanguin est observée dans l'hépatite parenchymateuse, la cirrhose (une forte diminution de la fonction de formation d'urée du foie), l'éclampsie et pendant la grossesse.

Une teneur réduite en urée dans l'urine est observée dans les cas de néphrite, d'acidose, d'ictère parenchymateux et de cirrhose du foie.

CONCLUSION:

Date ________________

Leçon n°31

TRAVAIL D'AUDITEUR INDÉPENDANT

SUR LE THÈME « MÉTABOLISME ET FONCTIONS DES ACIDES AMINÉS. ÉCHANGE DE NUCLÉOTIDES"

Tâches pour le travail indépendant :

1.Faites une carte métabolique du métabolisme des acides aminés.

Marquer sur la carte :

2.1. Sources d'acides aminés dans les tissus.

2.2. Voies de transformation des acides aminés dans les tissus.

2.3. Enzymes régulatrices de la glycolyse, du métabolisme du glycogène, de la gluconéogenèse, de la voie des pentoses phosphates.

2.4. Enzymes vitamino-dépendantes.

Résoudre et discuter de problèmes situationnels.

Date: ________________

LEÇON N°33

TRAVAIL N°1. DÉTERMINATION QUALITATIVE ET QUANTITATIVE DE LA BILIRUBINE (PAR MÉTHODE JENDRASZIK)

JUSTIFICATION DU TRAVAIL. Lorsque les globules rouges sont détruits (chez l'homme, après 100 à 120 jours), l'hémoglobine se désintègre dans les cellules du système réticuloendothélial de la moelle osseuse, de la rate et du foie. Le produit final de la dégradation de l’hème est la bilirubine indirecte, qui pénètre dans le sang et est transportée par l’albumine jusqu’au foie, où elle est neutralisée pour former de la bilirubine directe.

Il existe deux types de bilirubine dans le sérum sanguin. La forme principale est la bilirubine indirecte (libre), qui n'est pas associée à l'acide glucuronique et donne une diazoréaction indirecte. Le sang contient une petite quantité de bilirubine directe (liée) - cette bilirubine est associée au glucuronate et donne une diazoréaction directe. La somme des deux pigments donne la bilirubine totale.

La violation du métabolisme de la bilirubine s'accompagne du développement d'un ictère. À cet égard, une détermination quantitative distincte de la bilirubine totale, directe et indirecte dans le sérum sanguin est importante pour le diagnostic différentiel de différents types d'ictère.

PRINCIPE DE LA MÉTHODE : Le diazoréactif donne une couleur rose avec la bilirubine directe. La bilirubine indirecte est convertie en un état soluble en ajoutant un réactif à base de caféine au sérum, après quoi la bilirubine totale est déterminée par la diazoréaction. L'intensité de la couleur est directement proportionnelle à la concentration de bilirubine dans l'échantillon.

PROGRÈS: prenez trois tubes à essai : expérience 1, 2 et contrôle.

MESURE			CONTRÔLE
	BILIRUBINE	BILIRUBINE
SÉRUM SANGUIN CAFÉINE DIAZOREACTIVE

Mélanger le contenu des tubes et incuber

à une température de 18°C.

À PROPOS DE L'ESSAI 1 - photométrie après 10 minutes

contre le contrôle

EXPÉRIENCE 2 - photométrie après 20 minutes

Longueur d'onde : 530-550 nm, cuvette de 5 mm.

RÉSULTAT:

RÉSULTAT FINAL : trouvé à partir du graphique d’étalonnage. La différence entre la quantité de bilirubine totale et directe détermine le niveau de bilirubine indirecte.

VALEUR DIAGNOSTIQUE CLINIQUE.

La teneur normale en bilirubine totale dans le sérum sanguin est de 5,0 à 20,5 µmol/l ; bilirubine liée (directe) – 1,0 - 7,5 µmol/l ; bilirubine libre (indirecte) – 1,7 – 17,1 µmol/l.

Une teneur accrue en bilirubine totale dans le sérum sanguin est observée avec une jaunisse des nouveau-nés, des lésions des hépatocytes (inflammatoires, toxiques), un blocage des voies biliaires et une maladie hémolytique.

À parenchyme jaunisse:

La teneur en bilirubine directe et indirecte augmente dans le sang ;

La bilirubine directe et l'urobilinogène apparaissent dans l'urine.

À obstructif ictère (mécanique) :

Le niveau de bilirubine directe dans le sang augmente ;

La bilirubine directe (urine foncée) apparaît dans l'urine ;

L'excrétion de la stercobiline (fèces incolores) diminue.

À hémolytique jaunisse:

La teneur en bilirubine indirecte augmente dans le sang ;

La teneur en stercobilinogène augmente dans l'urine ;

La sécrétion de stercobiline (selles foncées) augmente.

CONCLUSION:

La teneur en urée dans le sérum sanguin est de 20 à 40 mg% ou de 2,5 à 8,32 m mol/l.

Travail de laboratoire n°15

Détermination quantitative de la vitamine C

Dans le sérum sanguin

Principe de la méthode: le dosage quantitatif de la vitamine C dans le sérum sanguin repose sur sa capacité à réduire le 2,6-dichlorophénolindophénol, qui est bleu en milieu alcalin et rouge en milieu acide.

Avancement des travaux: Un volume égal d'acide sulfosalicylique à 20 % est ajouté à 5 ml de sérum sanguin pour précipiter les protéines. La protéine précipitée est filtrée, 6 ml du filtrat sont versés dans une fiole de titrage (cela correspondra à 3 ml de sérum sanguin) et titrés à la microburette avec une solution 0,001 N de 2,6-dichlorophénolindophénol jusqu'à disparition d'une couleur rose. disparaître dans les 30 secondes. Calculez la teneur en vitamine C dans le sang à l'aide de la formule :

g équiv. vitamine C x A x 100

X= _________________________________ = mg %

G - équiv. Vitamine C-gramme équivalent à Vit C = 88

N - normalité de la solution de 2,6-dichlorophénolindophénol = 0,001

A est la quantité de ml de 2,6-dichlorphénolindophénol utilisée pour le titrage.

B - nombre de ml de sérum prélevés dans l'expérience (3 ml)

Coefficient de 100 pour la conversion en mg%

Normale : 0,8-1,2 mg%.

Travaux de laboratoire n°16 détermination de la teneur en vitamine C dans les urines

La détermination de la teneur en vitamine C dans les urines donne une idée des réserves de cette vitamine dans l'organisme, puisqu'il existe une correspondance entre la concentration de vitamine C dans le sang et la quantité de cette vitamine excrétée dans les urines.

Avancement des travaux: 10 ml d'urine et 10 ml d'eau distillée sont dosés dans une fiole conique, mélangés, acidifiés avec 1 ml d'acide acétique concentré et titrés avec une solution 0,001 N de 2,6-dichlorophénolindophénol jusqu'à coloration rose.

Calculez la teneur en vitamine C à l'aide de la formule :

0,088 x A x 1 500

X=________________= mg/jour

A - la quantité de solution 0,001 N de 2,6 dichlorophénolindophénol en ml, consommée pour le titrage

10 - la quantité d'urine prélevée pour le titrage

1 500 est la quantité approximative d’urine prélevée.

Norme : 10-20 mg/jour.

Travail de laboratoire n°17 ​​Test de coagulation de Veltman

Valeur de la méthode: Le sérum sanguin peut être représenté comme un système colloïdal dont la stabilité dépend de la teneur en fractions protéiques du sang et du rapport entre elles. Les albumines, protéines de petite taille moléculaire et aux propriétés électriques prononcées, ont une stabilité accrue. charge et degré élevé d’hydratation. Dans les globulines, de grandes tailles moléculaires sont associées à une charge plus faible et à un degré d’hydratation plus faible. En raison de ces caractéristiques, la stabilité des globulines est nettement inférieure. La stabilité colloïdale du sérum sanguin diminue avec une diminution de la fraction albumine, avec des maladies du foie (hépatite, cirrhose, atrophie jaune aiguë du foie), avec des conditions hémolytiques. On pense également que le test de coagulation diminue avec une augmentation de la teneur en gammaglobulines, ce qui réduit la stabilité du sérum. Une augmentation de l'échantillon est observée lors de processus inflammatoires et exsudatifs aigus, lorsque le nombre d'alpha et de bêta-globulines augmente, augmentant la stabilité du sérum (phase exsudative des rhumatismes, processus actif de tuberculose pulmonaire, tumeurs malignes, pertes de liquide importantes, maladies infectieuses aiguës). . Dans les laboratoires de diagnostic clinique, des méthodes sont largement utilisées pour détecter des modifications dans la composition des protéines du sérum sanguin par des réactions de coagulation. L'une de ces méthodes est le test de coagulation Veltman.

Principe de la méthode : La stabilité des solutions de composés de haut poids moléculaire (protéines) dépend de deux facteurs : l'ampleur de la charge des molécules et le degré de leur solvatation. Dans le test de Veltman, pour obtenir la coagulation des protéines du sérum sanguin, on utilise une solution de CaCI2 qui, en tant qu'électrolyte, réduit la charge des molécules et la dénaturation thermique, à la suite de quoi les molécules de protéines acquièrent des propriétés hydrophobes et perdent leur enveloppe d'hydratation.

Avancement des travaux: A 0,1 ml de sérum sanguin ajouter 4,9 ml d'eau distillée, mélanger et ajouter 0,1 ml de solution de CaCI2, agiter et chauffer sur feu jusqu'à ce que

ébullition. Refroidir et observer à la lumière l'apparition d'une coagulation protéique. Si les protéines ne sont pas coagulées, ajoutez encore 0,1 ml de CaCI2 et faites bouillir à nouveau. La procédure est répétée jusqu'à ce que

jusqu'à ce que les flocons tombent. Les résultats sont évalués en calculant la quantité totale de solution à 0,5 % de CaCI2 utilisée pour la réaction. Normalement, la réaction se produit lorsque 0,4 à 0,5 ml de CaCI2 sont ajoutés.

Travail n°8 Détermination de la teneur en urée dans le sérum sanguin et les urines par réaction colorée avec la diacétyle monooxime

Principe de la méthode.

L'urée forme un complexe rouge avec la diacétyle monooxime dans un environnement fortement acide en présence de thiosemicarbazide et d'ions ferriques.

Réactifs.

1. Solution étalon (10 ml)

urée 16,65 mmol/l

2. Diacétyle monooxime (10 comprimés)

chaque comprimé contient du diacétyle monooxime 0,5 mmol, du thiosemicarbazide

0,08 mmol, sel ferrique 2,5 µmol.

Composition du mélange réactionnel.

Diacétyle monooxime 5,0 mmol/l

Thiosémicarbazide 0,9 mmol/l

Acide sulfurique 0,9 mol/l

Sel ferrique 25,0 µmol/l

Rapport mélange sérum/réaction 1/121

Préparation de solutions de travail.

Solution 1. Dans une fiole jaugée de 50 ml, dissoudre dans 30 ml de dist. eau à température élevée, un comprimé de réactif 2. Après refroidissement, ajouter de l'eau jusqu'au trait. La présence d'un petit précipité insoluble ne gêne pas le dosage.

Stabilité : plusieurs mois (de +15 à +25 C).

Solution 2. Préparez en mélangeant 1 partie de solution 1 avec 1 partie de solution d'acide sulfurique.

Résistance : 1 jour (de +15 à +25 C).

Effectuer une analyse.

Longueur d'onde (490-540) nm

Cuvettes 1 cm

Température (de +15 à +25 C)

Dans trois tubes à essai à paroi mince, la solution 2 est mélangée dans un rapport de 200 + 1 avec du sérum ou de l'urine diluée (échantillon), du réactif 1 (standard) ou de l'eau distillée (solution témoin) et le contenu est mélangé. Avant analyse, l'urine est diluée avec du dist. eau de 1 + 50 à 1 + 100 (résultat x dilution).

Calcul.

Urée (mmol/l) = 16,65 x (A 1 / A 2)

Avertissement.

Urine : 333,0 - 582,8 mmol/jour.

Principe de la méthode

L'urée forme un complexe rouge avec la diacétyle monooxime dans un environnement fortement acide en présence de thiosemicarbazide et d'ions ferriques.

Réactifs nécessaires

1. Acide trichloroacétique, 100 g/l.

2. Diacétyle monooxime, solution aqueuse à 25 g/l. Le réactif est stable.

3. Thiosémicarbazide, solution aqueuse à 2,5 g/l. Pour préparer le réactif, vous pouvez également utiliser du chlorhydrate de thiosemicarbazide ; cette dernière est utilisée sous forme d'une solution aqueuse à 3,2 g/l. Les deux réactifs sont stables lorsqu’ils sont conservés dans un récipient sombre à température ambiante.

4. Acide sulfurique concentré.

5. Acide orthophosphorique 85 %.

6. Chlorure ferrique. Solution mère de chlorure ferrique : 5 g de chlorure ferrique sont dilués à 100 ml avec de l'eau et acidifiés par ajout de 1 ml d'acide sulfurique concentré. Une solution de travail de chlorure ferrique est préparée à partir de la solution basique : 1 ml de la solution basique de chlorure ferrique est porté à 100 ml avec de l'eau, puis 8 ml d'acide sulfurique concentré et 1 ml d'acide phosphorique à 85 % sont ajoutés.
Conserver dans un récipient sombre. Idéal pour 2 semaines.

7. Acide benzoïque, 2 g/l. 0,2 g d'acide benzoïque cristallisé est dissous dans 100 ml d'eau sous forte agitation au bain-marie.

8. Urée pour préparer une solution d'étalonnage. Préparer une solution d'urée à 7 mmol/l : 42 mg d'urée sont dissous dans l'eau dans une fiole jaugée de 100 ml. Une solution d'acide benzoïque à 2 g/l peut être utilisée comme solvant. Une solution d'étalonnage préparée avec une solution d'acide benzoïque est plus stable qu'une solution aqueuse ; 1 ml de solution d'étalonnage contient 0,007 mmol d'urée.

9. Réactif colorant : à 30 ml de solution de travail de chlorure ferrique, ajouter 20 ml d'eau, 1 ml de solution de diacétyle monooxime à 25 g/l et 0,25 ml de solution de thiosemicarbazide à 2,5 g/l. Le réactif colorant est préparé à chaque fois avant utilisation.

Progrès dans la détermination de l’urée dans le sérum sanguin

Test expérimental : verser 0,8 ml d'eau, 0,2 ml de sérum et 1 ml de solution d'acide trichloroacétique à 100 g/l dans un tube à centrifuger et mélanger.
Après 15 à 20 minutes, centrifugez. Ajouter 0,5 ml de liquide surnageant et 5 ml de réactif coloré dans un tube à essai propre. Le tube à essai est conservé dans un bain-marie bouillant pendant 20 minutes, puis refroidi pendant 2-3 minutes sous l'eau courante. La mesure est effectuée sur un photomètre à une longueur d'onde de 530-560 nm (filtre vert) contre un échantillon à blanc dans une cuvette d'une épaisseur de couche de 1 cm. L'échantillon à blanc est placé de la même manière que l'échantillon expérimental, mais. au lieu du liquide surnageant, on prélève 0,5 ml d'eau.

Le calcul est effectué selon la formule par comparaison avec l'échantillon d'étalonnage. L'échantillon d'étalonnage est placé de la même manière que l'échantillon expérimental, mais à la place du sérum, on prélève 0,2 ml de la solution d'étalonnage.

Concentration d'urée, mmol/l :

Eop / Ek ґ Sk,

Où Eop est l'extinction de l'échantillon expérimental ;

Sk - concentration d'urée dans la solution d'étalonnage, 7 mmol/l.
Le dosage de l'urée dans l'urine s'effectue de la même manière que le dosage de l'urée dans le sérum sanguin, mais au lieu du sérum, on prélève 0,2 ml d'urine diluée.
En parallèle, traitez l'échantillon d'étalonnage comme décrit pour la détermination de l'urée dans le sérum sanguin.

Le calcul de l'urée pour la quantité quotidienne d'urine est effectué à l'aide de la formule suivante :

Msut = Sk ґ Eop ґ a ґ K / Ek ґ b,

Où Msut est la quantité d'urée dans l'urine quotidienne, en mmol ;

Eop - extinction de l'échantillon expérimental ;

Ek - extinction de l'échantillon d'étalonnage ;

A - quantité quotidienne d'urine, ml ;

B - quantité d'urine prélevée pour analyse, ml ;

K est le coefficient de dilution des urines.

Remarques

1. La mesure est effectuée au plus tard 15 minutes après refroidissement des échantillons en raison de l'instabilité des couleurs.

2. En raison de l'instabilité du complexe coloré d'urée avec la diacétyle monooxime et de la dépendance de la couleur aux conditions de chauffage, l'échantillon d'étalonnage est déterminé parallèlement à chaque série d'expériences.

3.
Si la teneur en urée du sérum sanguin est supérieure à 17 mmol/l, le sérum est dilué avec une solution isotonique de chlorure de sodium et les résultats sont multipliés par le facteur de dilution.

4. Pour convertir en azote uréique, les résultats doivent être divisés par 2,14.

(méthode à la diacétyle monooxime)

L'urée est un produit formé dans le foie lors de la neutralisation de l'ammoniac. L'urée est le principal produit final du métabolisme des protéines. Environ 50 % de l’azote résiduel non protéique présent dans le sang est de l’urée.

PRINCIPE DE LA MÉTHODE : l'urée forme un composé complexe rouge avec la diacétyle monooxime dans un environnement fortement acide en présence de thiosemicarbazide et d'ions ferriques, dont l'intensité de la couleur détermine sa concentration.

PROGRÈS: prenez trois tubes à essai : expérience, étalon, contrôle.

Placer tous les tubes à essai dans un bain-marie à 100°C pendant 5 minutes.

Refroidir et mesurer l'extinction par rapport au contrôle à 500-560 nm ; cuvette 5 mm. Les mesures sont effectuées dans un délai de 15 minutes.

RÉSULTAT:

C st = 16,65 mmol/l.

RÉSULTAT FINAL : calculé par la formule :

Avec op = ----- · 16,65 = mmol/litre.

La teneur normale en urée dans le sérum sanguin chez l'adulte est de 2,5 à 8,33 mmol/l ; dans l'urine 333 - 582 mmol/jour. Chez les nouveau-nés, la teneur normale en urée dans le sérum sanguin est de 3,5 à 11 mmol/l, chez les enfants de 2 à 14 ans, elle est de 2,5 à 8,33 mmol/l.

Une légère augmentation de la concentration d'urée dans le sérum sanguin est observée avec une alimentation excessive en aliments protéinés et avec le vieillissement.

Une augmentation significative de la concentration d'urée dans le sérum sanguin (urémie) est observée en cas d'insuffisance rénale, de déshydratation (vomissements, diarrhée), de choc, de dégradation accrue des protéines et de septicémie.

Une teneur réduite en urée dans le sérum sanguin est observée dans l'hépatite parenchymateuse, la cirrhose (une forte diminution de la fonction de formation d'urée du foie), l'éclampsie et pendant la grossesse.

Une teneur réduite en urée dans l'urine est observée dans les cas de néphrite, d'acidose, d'ictère parenchymateux et de cirrhose du foie.

CONCLUSION:

Date ________________

LEÇON N°31

TRAVAIL D'AUDITEUR INDÉPENDANT

SUR LE THÈME « MÉTABOLISME ET FONCTIONS DES ACIDES AMINÉS. ÉCHANGE DE NUCLÉOTIDES"

Tâches pour le travail indépendant :

1. 1.Établissez une carte métabolique du métabolisme des acides aminés.

2. Marquez sur la carte :

2.1. Sources d'acides aminés dans les tissus.

2.2. Voies de transformation des acides aminés dans les tissus.

2.3. Enzymes régulatrices de la glycolyse, du métabolisme du glycogène, de la gluconéogenèse, de la voie des pentoses phosphates.

2.4. Enzymes vitamino-dépendantes.

3. Résoudre et discuter des problèmes situationnels.

Date: ________________

LEÇON N°33

TRAVAIL N°1. DÉTERMINATION QUALITATIVE ET QUANTITATIVE DE LA BILIRUBINE
(PAR MÉTHODE JENDRASZIK)

JUSTIFICATION DU TRAVAIL. Lorsque les globules rouges sont détruits (chez l'homme, après 100 à 120 jours), l'hémoglobine se désintègre dans les cellules du système réticuloendothélial de la moelle osseuse, de la rate et du foie. Le produit final de la dégradation de l’hème est la bilirubine indirecte, qui pénètre dans le sang et est transportée par l’albumine jusqu’au foie, où elle est neutralisée pour former de la bilirubine directe.

Il existe deux types de bilirubine dans le sérum sanguin. La forme principale est la bilirubine indirecte (libre), qui n'est pas associée à l'acide glucuronique et donne une diazoréaction indirecte. Le sang contient une petite quantité de bilirubine directe (liée) - cette bilirubine est associée au glucuronate et donne une diazoréaction directe. La somme des deux pigments donne la bilirubine totale.

La violation du métabolisme de la bilirubine s'accompagne du développement d'un ictère. À cet égard, une détermination quantitative distincte de la bilirubine totale, directe et indirecte dans le sérum sanguin est importante pour le diagnostic différentiel de différents types d'ictère.

PRINCIPE DE LA MÉTHODE : Le diazoréactif donne une couleur rose avec la bilirubine directe. La bilirubine indirecte est convertie en un état soluble en ajoutant un réactif à base de caféine au sérum, après quoi la bilirubine totale est déterminée par la diazoréaction. L'intensité de la couleur est directement proportionnelle à la concentration de bilirubine dans l'échantillon.

PROGRÈS: prenez trois tubes à essai : expérience 1, 2 et contrôle.

Mélanger le contenu des tubes et incuber

à une température de 18°C.

EXPÉRIENCE 1 - photométrie après 10 minutes

Contre le contrôle

EXPÉRIENCE 2 - photométrie après 20 minutes

Longueur d'onde : 530-550 nm, cuvette de 5 mm.

RÉSULTAT:

RÉSULTAT FINAL : trouvé à partir du graphique d’étalonnage. La différence entre la quantité de bilirubine totale et directe détermine le niveau de bilirubine indirecte.

Bilirubine directe :

C = µmol/l

Bilirubine totale :

C = µmol/l

Bilirubine indirecte :

C = µmol/l

VALEUR DIAGNOSTIQUE CLINIQUE.

La teneur normale en bilirubine totale dans le sérum sanguin chez l'adulte est de 5,0 à 20,5 µmol/l ; bilirubine liée (directe) – 1,0 - 7,5 µmol/l ; bilirubine libre (indirecte) – 1,7 - 17,1 µmol/l.

Chez les nouveau-nés, la teneur normale en bilirubine totale dans le sérum sanguin est de 12 à 20 µmol/l, chez les enfants de 2 à 14 ans, elle est de 8,55 à 20,52 µmol/l.

Une teneur accrue en bilirubine totale dans le sérum sanguin est observée avec une jaunisse des nouveau-nés, des lésions des hépatocytes (inflammatoires, toxiques), un blocage des voies biliaires et une maladie hémolytique.

À parenchyme jaunisse:

La teneur en bilirubine directe et indirecte augmente dans le sang ;

La bilirubine directe et l'urobilinogène apparaissent dans l'urine.

L'excrétion de la stercobiline dans les selles est réduite.

À obstructif ictère (mécanique) :

Le niveau de bilirubine directe dans le sang augmente ;

La bilirubine directe (urine foncée) apparaît dans l'urine ;

Il n'y a pas de sécrétion de stercobiline (fèces acholiques).

À hémolytique jaunisse:

La teneur en bilirubine indirecte augmente dans le sang ;

La teneur en stercobilinogène augmente dans l'urine ;

La sécrétion de stercobiline (selles foncées) augmente.

CONCLUSION:

Date ______________

LEÇON N°34

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