Qon zardobida karbamidni aniqlashning diagnostik ahamiyati. Qon zardobidagi karbamidni diatsetil monooksim bilan rang reaksiyasi orqali aniqlash

Karbamid oqsillarning asosiy parchalanish mahsulotidir. Bu kimyoviy shakl bo'lib, unda organizmga kerak bo'lmagan azot siydik orqali chiqariladi.

Buyrak etishmovchiligi tufayli qonda karbamid va boshqa azotli birikmalarning to'planishi uremiyaga olib keladi.

Rus tilining sinonimlari

Qonda karbonat kislota diamid, karbamid, karbamid.

SinonimlarIngliz

Karbamid azoti, karbamid, qon karbamid azoti (BUN), karbamid, plazma karbamid.

Tadqiqot usuli

UV kinetik testi.

O'lchov birliklari

mmol/l (litr uchun millimol).

Tadqiqot uchun qanday biomaterialdan foydalanish mumkin?

Venoz, kapillyar qon.

Tadqiqotga qanday to'g'ri tayyorgarlik ko'rish kerak?

• Sinovdan 12 soat oldin ovqatlanmang.
• Qon topshirishdan 30 daqiqa oldin jismoniy va hissiy stressdan saqlaning va chekmang.

Tadqiqot haqida umumiy ma'lumot

Karbamid oqsil almashinuvining yakuniy mahsulotlaridan biri bo'lib, azotni o'z ichiga oladi. U jigarda ishlab chiqariladi, qon orqali buyraklarga ko'chiriladi, u erda glomerulus orqali filtrlanadi va keyin chiqariladi. Karbamid testi natijasi glomerulyar ishlab chiqarish va siydik chiqarishning ko'rsatkichidir.

Metabolizatsiyalangan azot organizmda oqsil parchalanishi va qayta ishlash qoldiqlaridan hosil bo'lgan ammiak shaklida bo'ladi. Jigardagi ammiak karbonat angidrid bilan birikib, karbamid hosil qiladi. Proteinning tez parchalanishi va buyraklarning shikastlanishi qondagi karbamid miqdorini tezda oshiradi (deyarli har qanday massiv hujayra o'limi kabi).

Chiqarilgan karbamid miqdori to'g'ridan-to'g'ri odam tomonidan iste'mol qilinadigan protein darajasiga bog'liq bo'lib, u isitma sharoitida, diabetning asoratlari va buyrak usti bezlarining gormonal funktsiyasi oshishi bilan ortadi; Ko'tarilgan karbamid darajasi glomerulyar filtratsiyaning pasayishi belgisidir.

Karbamid qondagi asosiy metabolitlardan biri bo'lib, organizm uni hech qanday tarzda ishlatmaydi, faqat undan xalos bo'ladi; Bu chiqarish jarayoni uzluksiz bo'lgani uchun ma'lum miqdorda karbamid doimo qonda bo'ladi.

Karbamid darajasini kreatinin qiymatlaridan ajralmas tarzda talqin qilish kerak. "Uremiya" atamasi qonda karbamid kontsentratsiyasi 20 mmol / l dan oshganda qo'llaniladi.

Karbamid kontsentratsiyasining ortishi bilan ham ko'rsatiladigan azotemiya ko'pincha buyrak kasalligi tufayli etarli darajada chiqarilmasligining natijasidir.

Ko'pgina jigar kasalliklarida qonda karbamid miqdori kamayadi. Bu shikastlangan jigar hujayralarining karbamidni sintez qila olmasligi tufayli yuzaga keladi, bu o'z navbatida qonda ammiak kontsentratsiyasining oshishiga va jigar ensefalopatiyasining rivojlanishiga olib keladi.

Buyrak etishmovchiligi glomerulus qon metabolitlarini o'zi orqali filtrlash qobiliyatini yo'qotganda yuzaga keladi. Bu kasallik, dori-darmonlarni qabul qilish, zaharlanish yoki shikastlanishga javoban to'satdan (o'tkir buyrak etishmovchiligi) paydo bo'lishi mumkin. Ba'zida bu surunkali buyrak kasalliklari (pyelonefrit, glomerulonefrit, amiloidoz, buyrak shishi va boshqalar) va boshqa organlar (qandli diabet, gipertenziya va boshqalar) oqibatidir.

Karbamid testi odatda kreatinin testi bilan birgalikda buyuriladi.

Tadqiqot nima uchun ishlatiladi?

• Bir qator sharoitlarda buyraklar faoliyatini baholash uchun (kreatinin testi bilan birgalikda).
• Buyrak kasalliklarini tashxislash va surunkali yoki o'tkir buyrak etishmovchiligi bo'lgan bemorlarning holatini tekshirish uchun.

O'qish qachon rejalashtirilgan?

• Karbamid biokimyoviy tadqiqot paytida tekshiriladi:
  • o'ziga xos bo'lmagan shikoyatlar uchun,
  • dori terapiyasini buyurishdan oldin buyrak funktsiyasini baholashda,
  • o'tkir kasallik tufayli bemorni kasalxonaga yotqizishdan oldin,
  • odam kasalxonada bo'lganida.
• Buyrak disfunktsiyasi belgilari uchun:
  • zaiflik, charchoq, e'tiborning pasayishi, ishtahaning yomonlashishi, uyqu muammolari,
  • yuzning, bilakning, to'piqning shishishi, astsit,
  • ko'pikli, qizil yoki qahva rangli siydik
  • diurezning pasayishi,
  • siyish bilan bog'liq muammolar (yonish, intervalgacha, tungi diurezning ustunligi,
  • lomber mintaqada (ayniqsa, umurtqa pog'onasining yon tomonlarida), qovurg'alar ostidagi og'riqlar,
  • yuqori qon bosimi.
• Bundan tashqari, ushbu tahlil vaqti-vaqti bilan amalga oshirilishi mumkin:
  • surunkali buyrak kasalligi yoki buyrak bo'lmagan surunkali kasalliklari, masalan, diabet, konjestif yurak etishmovchiligi, miyokard infarkti, arterial gipertenziya va boshqalarning holatini tekshirish;
  • buyrak funktsiyasi holatini aniqlash uchun dori terapiyasidan oldin va davomida,
  • ularning samaradorligini baholash uchun dializ seanslaridan keyin.

Natijalar nimani anglatadi?

Malumot qiymatlari

Yoshi, jinsi		Malumot qiymatlari
		1,8 - 6 mmol/l
		2,5 - 6 mmol/l
		2,9 - 7,5 mmol/l
20-50 yil		3,2 - 7,3 mmol/l
		2,6 - 6,7 mmol/l
		3 - 9,2 mmol/l
		3,5 - 7,2 mmol/l

Karbamid darajasining oshishi sabablari:

• konjestif yurak etishmovchiligi, tuzlar va suyuqliklarning yo'qolishi, ortiqcha protein katabolizmi bilan birgalikda shok (oshqozon-ichakdan qon ketish, o'tkir miokard infarkti, stress, kuyishlar) tufayli buyrak funktsiyasining pasayishi;
• surunkali buyrak kasalligi (pyelonefrit, glomerulonefrit, amiloidoz, buyrak tuberkulyozi va boshqalar),
• siydik yo'llarining obstruktsiyasi (quviq o'smasi, prostata adenomasi, urolitiyoz va boshqalar),
• oshqozon-ichak traktining yuqori qismidan qon ketishi (oshqozon, o'n ikki barmoqli ichakning oshqozon yarasi, oshqozon saratoni, o'n ikki barmoqli ichak va boshqalar),
• ketoatsidozli diabetes mellitus,
• saraton kasalligida protein katabolizmining kuchayishi,
• kortikosteroidlar, nefrotoksik dorilar, tetratsiklinlar, ortiqcha tiroksin,
• anabolik steroidlardan foydalanish,
• oqsilga boy oziq-ovqat (go'sht, baliq, tuxum, pishloq, tvorog).

Kam karbamid darajasining sabablari:

• jigar etishmovchiligi, jigarning ba'zi kasalliklari: gepatit, siroz, o'tkir gepatodistrofiya, jigar o'smalari, jigar komasi, gepatotoksik zaharlar bilan zaharlanish, giyohvand moddalarning haddan tashqari dozasi (bu karbamid sintezini buzadi),
• akromegali (somatotrop gormonning ko'payishi bilan tavsiflangan gormonal kasallik),
• ro'za, past proteinli diet,
• ichakda so'rilishning buzilishi (malabsorbtsiya), masalan, çölyak kasalligi bilan,
• nefrotik sindrom (siydikda oqsil ajralishining ko'payishi, giperlipidemiya, qondagi protein miqdorining pasayishi),
• antidiuretik gormon (ADH) ishlab chiqarishning ko'payishi va natijada patologik gipervolemiya;
• homiladorlik (oqsil sintezining ortishi va buyrak filtratsiyasining kuchayishi homilador ayollarda karbamid miqdorining pasayishiga olib keladi).

Natijaga nima ta'sir qilishi mumkin?

Usulning printsipi Nessler usuli yordamida kolorimetrik usuldan foydalangan holda, ureaza ta'sirida qon zardobida yoki butun qonda karbamidning parchalanishi paytida ajralib chiqadigan ammiak miqdorini aniqlashga asoslangan.

Surunkali buyrak shikastlanishi, to'qimalarda oqsillarning ko'payishi, ichak tutilishi va siydik yo'llarining tiqilib qolishi bilan yuzaga keladigan karbamid kontsentratsiyasining oshishi diagnostik ahamiyatga ega. Karbamid darajasining pasayishi ro'za tutish, proteinsiz diet va karbamid hosil bo'lishining fermentativ nuqsonlari paytida sodir bo'ladi.

Kreatin va kreatinin. Kreatininni miqdoriy aniqlash, roli,

Diagnostik qiymat.

Kreatin- umurtqali hayvonlar tanasida uchraydigan azotli karboksilik kislota. Mushak va nerv hujayralarida energiya almashinuvida ishtirok etadi.

Kreatinin- kreatin fosfat reaktsiyasining yakuniy mahsuloti. Kreatinin mushaklarda hosil bo'ladi va keyin qonga chiqariladi. Kreatinin mushak va boshqa to'qimalarning energiya almashinuvida ishtirok etadi. Kreatinin organizmdan buyraklar orqali siydik bilan chiqariladi, shuning uchun kreatinin (uning qondagi miqdori) buyraklar faoliyatining muhim ko'rsatkichidir.

Usulning printsipi kreatininning ishqoriy muhitda pirik kislota bilan to'q sariq rangli mahsulotlarni hosil qilish qobiliyatiga asoslangan. Rivojlanayotgan binoni intensivligi kreatinin miqdori bilan mutanosibdir.

Diagnostik ahamiyatga ega: qon zardobidagi kreatinin miqdori buyrak etishmovchiligi, konjestif yurak etishmovchiligi, akromegaliya va dietada hayvon oqsillarining ko'pligi bilan keskin ortadi.

39. Dasturlashtirilgan boshqaruv – 3: formulalarni bilish: FAFS, UDFGK

(kengaytirilgan); ammiakni neytrallash reaksiyalari kimyosi

hosil bo'lishi, karbamid va kreatinin sintezi, hosil bo'lish kimyosi

ammoniy tuzlari, ammiakning transport shakllari, neytrallash

biogen aminlar.

FAFS UND UDFGK.

Zararsizlantirish mexanizmlari mavjud.

Karbamid sintezi.

Kreatin sintezi.

Kreatinin:

Reaktivlar. Rangli reagent*; karbamid, standart eritma 1 g/l yoki 16,65 mmol/l; "Ureatest" to'plami.

Uskunalar. Sinov naychalari bo'lgan raf; 0,1, 2 va 5 ml hajmli pipetkalar; alyuminiy folga; suv hammomi; FEC.

Material.

Qon zardobi.

Siydik kuniga yig'iladi, filtrlanadi va tahlil qilishdan oldin suv bilan 25 marta suyultiriladi.

A. Qon zardobidagi karbamid miqdorini aniqlash. Usul karbamidning kuchli kislotali muhitda tiosemikarbazid va temir tuzlari ishtirokida diatsetil monooksim bilan qizil rangli birikma hosil qilish qobiliyatiga asoslanadi, uning rang intensivligi tekshirilayotgan suyuqlikdagi karbamid miqdoriga mutanosibdir.

Qat'iylik taraqqiyoti. Probirkaga 10 marta suyultirilgan 0,1 ml qon zardobi, standart probirkaga bir xil hajmdagi standart karbamid eritmasi va nazorat probirkaga 0,1 ml distillangan suv o‘lchanadi. Barcha probirkalarga 2 ml rangli reagent soling va ularning tarkibini chayqatib yaxshilab aralashtiring.

Barcha quvurlar alyuminiy folga bilan qoplangan va qaynoq suv hammomida 10 daqiqa davomida isitiladi ( aniq! ). Keyin ularni sovuq suv ostida sovutib oling.

Nazorat namunasiga nisbatan standart va eksperimental namunalarning yo'qolishi FECda 540-560 nm (yashil filtr) qatlam qalinligi 0,5 sm bo'lgan kyuvetada o'lchanadi.

Eslatma . Rang beqaror, shuning uchun o'lchov 15 daqiqa ichida amalga oshirilishi kerak.

Hisoblash. Qon zardobidagi karbamid miqdori x (mmol/l) formula bo'yicha hisoblanadi

E op 16,65∙10

Bu erda E op - tajriba namunasining nazorat namunasiga nisbatan yo'qolishi;

E st - standart namunaning nazorat namunasiga nisbatan yo'qolishi;

16,65 – standart namunadagi karbamid konsentratsiyasi, mmol;

Karbamid azoti (mmol/l da) hosil bo'lgan sarum karbamid miqdorini 2,14 ga bo'lish yo'li bilan hisoblanadi (karbamid azotining molekulyar og'irligining butun karbamid molekulasining og'irligiga nisbatini ifodalovchi raqam).

b . Siydikdagi karbamid miqdorini aniqlash. Usulning printsipi avvalgi ishda bo'lgani kabi.

Qat'iylik taraqqiyoti. Tahlil qilish uchun 0,1 ml suyultirilgan siydik va 0,1 ml standart karbamid eritmasidan foydalaning va bu namunalarni qon zardobi bilan bir xil tarzda qayta ishlang.

Hisoblash formula bo'yicha amalga oshiriladi

E op V25∙1,665

E st 0,1∙1000

bu erda x - karbamid miqdori, mmol / kun;

V - kunlik siydik miqdori;

E op - tajribaning yo'q bo'lib ketishi;

E st - standartning yo'qolishi;

0,1 – tekshirish uchun olingan siydik hajmi, ml;

1000 - mmolni mmolga aylantirish omili.

V. Qon zardobidagi karbamid miqdorini Ureatest to'plamidan foydalangan holda ekspress usuli bilan aniqlash. Usul ureazaning karbamidni parchalash qobiliyatiga asoslangan bo'lib, ammiak hosil qiladi, bu reaktiv xromatografiya qog'ozining chizig'ini ko'k rangga aylantiradi. Rangli zonaning balandligi kalibrlash grafigidan hisoblangan karbamid kontsentratsiyasiga mutanosibdir.

Qat'iylik taraqqiyoti. Qon zardobi 1: 1 nisbatda suv bilan suyultiriladi. 0,03 ml suyultirilgan qon zardobi maxsus pipetka bilan qizil kerosin chizig'idan 3 mm uzoqlikda fermentga namlangan qog'oz tasmasi uchiga surtiladi. Ip darhol toza, quruq probirkaga solinadi, tiqin bilan germetik yopiladi va 37˚C da termostatga joylashtiriladi. 20 daqiqadan so'ng, chiziq olib tashlanadi va ko'k rangli maydonning balandligi o'lchanadi.

Hisoblash. Ureatest to'plamiga kiritilgan kalibrlash grafigi yordamida qon zardobidagi karbamid kontsentratsiyasi topiladi.

Ishni ro'yxatdan o'tkazish. Sinov zardobida va siydikda karbamid va karbamid azotining miqdorini hisoblang. Xulosa qilib, azot almashinuvidagi mumkin bo'lgan o'zgarishlarga e'tibor bering.

Ishning amaliy ahamiyati. Odatda odam qon zardobida karbamid miqdori 3,0-7,0 mmol/l, karbamid azoti esa 1,2-3,7 mmol/l ni tashkil qiladi. Qon zardobidagi karbamid miqdori oziq-ovqat bilan oqsillarni iste'mol qilishiga qarab sezilarli darajada farq qiladi. Qonda karbamid darajasining ko'tarilishi (azotemiya) buyrak kasalliklarida (ularning ekskretor funktsiyasi buzilganida), oqsillarning parchalanishi kuchayganida, ortiqcha protein bilan oziqlanishi, shuningdek tananing suvsizlanishida kuzatiladi. (bu holda azotemiyaning mutlaq emas, nisbiy shakli mavjud). Qonda karbamid darajasining pasayishi va uning siydik bilan chiqarilishi (odatda kuniga 333-582,8 mmol / kun chiqariladi) jigar kasalliklarida (parenximal sariqlik, jigar distrofiyasi, sirroz) kuzatiladi, bu buzilish bilan bog'liq. karbamid hosil qiluvchi funktsiya.

Ish 60. Qon zardobida va siydikda karbamid kontsentratsiyasini aniqlash

Siydik bilan kattalar kuniga 20-35 g yoki 333-583 mmol karbamid chiqaradi. Karbamid - ammiakni neytrallash jarayonida jigarda hosil bo'lgan karbonat kislota diamididir. Odatda qon zardobida 3,33-8,32 mmol/l karbamid mavjud.

Usulning printsipi. Karbamid kislotali muhitda tiosemikarbazid va temir tuzlari ishtirokida diatsetil monooksim bilan rangli birikmalar hosil qiladi. Rangning intensivligi tekshirilgan siydik va qon zardobidagi karbamid kontsentratsiyasiga to'g'ridan-to'g'ri proportsionaldir va fotometrik tarzda aniqlanadi.

O'rganilayotgan material: qon zardobi, siydik.

Reaktivlar: standart karbamid eritmasi (16,7 mmol/l). Temir xloridning 5% eritmasi (stok eritmasi: 5 g temir xlorid suv bilan 100 ml ga keltiriladi, keyin 1 ml konsentrlangan H 2 SO 4 bilan kislotalanadi; ish eritmasi stok eritmasidan tayyorlanadi: 1 ml zaxira. eritma distillangan suv bilan 100 ml hajmga keltiriladi, 8 ml konsentrlangan H 2 SO 4 va 1 ml 85% ortofosfor kislotasi qo'shiladi, eritma qorong'i idishda saqlanadi); Diasetilmoksimning 2,5% suvli eritmasi, tiosemikarbazidning 0,25% eritmasi (qorong'i idishda saqlanadi). Rangli xlorid reagenti (har safar ishlatishdan oldin tayyorlanadi): 30 ml temir xlorid ishchi eritmasiga 20 ml distillangan suv, 1 ml 2,5% diatsetilmoksim va 0,25 ml 0,25% tiasemikarbazid qo'shing.

Uskunalar: pipetkalar, probirkalar, FEC, optik uzunlikdagi kyuvetalar

yo'l 5 mm.

ISHLARNING RAVGUSI. Aniqlashdan oldin siydikni 10 marta suyultiring. Bir probirkaga 0,1 ml siydik, ikkinchisiga 0,1 ml qon zardobi, uchinchisiga esa standart karbamid eritmasi solinadi. Keyin barcha 3 probirkaga karbamidni aniqlash uchun 2 ml ishchi eritma qo'shiladi, aralashtiriladi va qaynab turgan suv hammomiga 10 daqiqaga qo'yiladi. Keyin probirkalar sovuq suv oqimida sovutiladi va suvga nisbatan optik yo'li uzunligi 5 mm bo'lgan kyuvetada yashil filtr yordamida kolorimetrlanadi.

Hisoblash quyidagi formula bo'yicha amalga oshiriladi:

167E op/E st (siydik uchun).

Siydikdagi karbamid miqdorining kamayishi nefrit, atsidoz, parenximal sariqlik, jigar sirrozi, uremiya va dietada protein etishmasligi, zararli anemiya, isitma, organizmdagi oqsillarning intensiv parchalanishi holatlarida kuzatiladi. , salitsilatlar qabul qilingandan keyin va fosfor bilan zaharlanganda.

Karbamidni aniqlashning ureaz usuli

Karbamid qoldiq azotning asosiy qismi bo'lib, uni aniqlash diagnostika maqsadida qo'llaniladi. Uning sintezi aminokislotalarning dezaminlanishi va purin va pirimidin nukleotidlarining parchalanishi paytida hosil bo'lgan ammiakdan jigarda sodir bo'ladi.

Qon zardobidagi karbamidning an'anaviy miqdoridan og'ish karbamid sintezi va uning chiqarilishi jarayonlarining tezligiga bog'liq. Qon zardobida karbamid miqdorining oshishi buyrak kasalligining asosiy belgilaridan biridir. Qoldiq azot fraktsiyalaridan karbamid darajasi birinchi navbatda ko'tariladi. Buyrak etishmovchiligida karbamid azoti qoldiq azot fraktsiyalarining 90% gacha bo'lishi mumkin.

Qon zardobidagi karbamid darajasining oshishi jigardan tashqari xarakterga ega bo'lishi mumkin: suyuqlik yo'qolishi bilan, jigarda karbamid sintezi buzilganligi sababli oqsillarning ko'payishi (o'tkir jigar atrofiyasi, og'ir jigar etishmovchiligi).

Usulning printsipi: Karbamid ureaza ta'sirida ammiak va karbonat angidridni hosil qilish uchun parchalanadi. Ureaz uchun karbamid yagona substratdir, shuning uchun ureaza usullari juda o'ziga xosdir. Chiqarilgan ammiak natriy gipoxlorit va fenol - indofenol (ko'k) bilan rangli mahsulot hosil qiladi. Rangning intensivligi karbamid tarkibiga proportsionaldir.

Reaktivlar:

2. Etilendiamin-N (N-tetraasetik kislota disodiy tuzi).

3 EDTA - bufer pH 6,5: 0,6 g Trilon B 30-40 ml suvda eritiladi, natriy gidroksid eritmasi bilan pH 6,5 ga sozlanadi va 50 ml gacha suv qo'shiladi.

4. Ureazaning buferdagi zahiradagi eritmasi: 20 mg ureaza 10 ml buferda eritiladi.

5. Ureazning ishchi eritmasi - aniqlashni boshlashdan oldin, asosiy eritmaning kerakli miqdorini oling va uni 1: 4 nisbatda bidistillangan suv bilan suyultiring.

7. Natriy nitroprussid 2-suv.

8. Rangli reagent: fenol - 0,11 mol/l, nitroprussid natriy - 0,18 mol/l: 0,0263 g natriy nitroprussid 500 ml hajmli o'lchov kolbasiga solinadi, taxminan 300 ml suv qo'shiladi, aralashtirib eritiladi. Keyin 5,18 g fenol qo'shing va markaga suv qo'shing.

9. Kaustik soda 1 mol/l; 0,26 mol/l.

10. Natriy gipoxlorid: 10 g oqartirgich 17 ml suv bilan 15 daqiqa davomida aralashtiriladi, keyin 17 ml suv va 7 g natriy karbonatdan iborat eritma qo'shiladi. Massa avval qalinlashadi, keyin esa suyultiriladi. Supernatant suyuqlik drenajlanadi va yuvilgan suv filtri orqali filtrlanadi. Eritma zaif sariq rangga ega bo'lishi bilanoq, 1% li kraxmal eritmasidan 10 tomchi qo'shing va rangi o'zgarmaguncha titrlang.

11. Natriy gipoxloritning asosiy eritmasi suv bilan suyultiriladi, shunda xlor konsentratsiyasi 0,78 g/l bo‘ladi, unga teng hajmdagi 0,26 mol/l natriy gidroksid eritmasi (100 ml + 100 ml) aralashtiriladi.

12. Karbamid.

13. Benzoy kislotasi, 2 g/l (kislota qizdirilganda eriydi).

14. Karbamid kalibrlash eritmasi, 0,5 mmol/L: 15 mg karbamidni 500 ml o'lchov kolbasida 2 g/l benzoik kislota eritmasida eritib yuboring.

Aniqlash jarayoni: Aniqlashdan oldin sarum 0,154 mol/l natriy xlorid eritmasi bilan 1:9 nisbatda suyultiriladi.

Sinov namunasi: probirkaga 100 mkl ureaza ishchi eritmasi, 20 mkl suyultirilgan sarum qo'shiladi. To'xtating, aralashtiring va 37 ° C da 15 daqiqa davomida inkubatsiya qiling. Inkubatsiyadan keyin 300 mkl rangli reagent va 300 mkl natriy gipoxlorit ishchi eritmasi qo'shing. Aralashtiring va 20-30 daqiqa davomida 37 ° C da inkubatsiya qiling. Yo'q bo'sh namunaga nisbatan 500-560 nm to'lqin uzunligida (yashil filtr) qatlam qalinligi 1 sm bo'lgan kyuvetada o'lchanadi.

Bo'sh namuna tajribadagi kabi qayta ishlanadi, ammo sarum o'rniga 0,154 mol/l eritma olinadi.

Kalibrlash namunasi tajriba bilan bir xil tarzda qayta ishlanadi, ammo sarum o'rniga karbamidning kalibrlash eritmasi olinadi. Bo'sh namunaga nisbatan bir xil sharoitlarda o'lchang.

Hisoblash quyidagi formula bo'yicha amalga oshiriladi:

Karbamid miqdori, mmol/l = -------- x 0,5 x 10

Bu erda E oo - tekshirilayotgan namunaning so'nishi, E k - kalibrlash namunasining so'nishi: 0,5 - kalibrlash eritmasidagi karbamid konsentratsiyasi mmol/l, 10 - suyultirish koeffitsienti.

Oddiy qiymatlar. Qon zardobi - 2,5-8,3 mmol / l yoki 20-50 mg / 100 ml.

Qon zardobidagi karbamid miqdorini aniqlash...................................................... ......... .........................................Sahifa 10

Laboratoriya ishi No15

Qon zardobida S vitamini miqdorini aniqlash...................................... ...................... ................................................. 11-bet

Laboratoriya ishi No16

Siydikdagi S vitamini miqdorini aniqlash...................................... ......... ................................................... ............... ...................11-bet

17-son laboratoriya ishi

Veltman koagulyatsion test................................................. ...... ................................................ ...................... ................................................12-bet

Laboratoriya ishi No18

Ishqoriy denaturatsiya orqali umumiy gemoglobinni aniqlash...................................... ......... ...................................12-bet

19-son laboratoriya ishi

Jedrashek usuli yordamida bilirubinni aniqlash...................................... ......... ................................................... ............... ............... 13-bet

20-sonli laboratoriya ishi

Qon zardobida kalsiy, fosfor miqdorini titrometrik usulda aniqlash

mureksiddan foydalanish bilan................................................. ...... ................................................... ...................... ................................................ ................... 14-bet

21-son laboratoriya ishi

Siydikning noorganik va organik tarkibiy qismlariga sifatli reaksiyalar...................................... ............ ......14-bet

22-son laboratoriya ishi

Tuprik oqsilini biuret usuli bilan aniqlash...................................... ...................... ................................................. ......................................15-bet

Laboratoriya ishi No1

Tuprik amilaza faolligini miqdoriy aniqlash...................................................... ........ ................................................ ..... 16-bet

Laboratoriya ishi No 2

Tuprik ishqoriy fosfataza faolligini aniqlash................................................... ................................... ................................ ................................ 16-bet

Laboratoriya ishi No3

Tuprikning transaminaza faolligini aniqlash................................................... ........ ................................................ .............. ......17-bet

Laboratoriya ishi No 4

Mureksid yordamida titrimetrik usulda tupurikdagi kalsiyni aniqlash....................................... ......18-bet

KFK-2 da ishlash qoidalari

1.Kalorimetrni 15 daqiqa ichida ulang. o'lchovlarni boshlashdan oldin. Isitish vaqtida kyuveta bo'limi ochiq bo'lishi kerak (bu holda fotodetektorlar oldidagi parda yorug'lik nurini to'sib qo'yadi).

2. Kerakli filtrni o'rnating. Yorug'lik filtrlarini almashtirishda "sezuvchanlik" tugmasi "1" holatida bo'lishi kerak (qizil yorug'lik filtri 670- "1", yashil yorug'lik filtri 540- "1") va "100 qo'pol o'rnatish" tugmasi ekstremal holatda bo'lishi kerak. chap holat (bu qurilmani ortiqcha yuk va shikastlanishdan himoya qiladi).

3. Yorug'lik oqimida o'lchovlar olib boriladigan nazorat eritmasi bilan kyuvetani joylashtiring.

4. Kyuveta ushlagichining ikkinchi katagiga tekshiriluvchi eritma solingan kyuvetani joylashtiring.

5. Kyuvetka bo'linmasining qopqog'ini yoping.

6. SENSITIVITY tugmasi va SETTING 100 ni avval qoʻpol, keyin FINE koʻrsatkichini kalorimetr shkalasida 100 ga oʻrnating.

7. Kyuvetka bo‘lmasi ostidagi tutqichni to‘xtaguncha burab, tekshiriluvchi eritma solingan kyuvetani yorug‘lik oqimiga kiriting.

8. Optik zichlik birliklarida D shkalasi bo'yicha o'qishni oling.

30-sonli dars 1-sonli ish. Qon zardobida karbamidni aniqlash (diatsetil monooksim usuli)

Karbamid ammiakni neytrallash jarayonida jigarda hosil bo'lgan mahsulotdir. Karbamid oqsil almashinuvining asosiy yakuniy mahsulotidir. Qonda oqsil bo'lmagan, qoldiq azotning taxminan 50% karbamiddir.

Usul printsipi: karbamid tiosemikarbazid va temir ionlari ishtirokida kuchli kislotali muhitda diatsetil monooksim bilan qizil rangli kompleks birikma hosil qiladi, rang intensivligi uning konsentratsiyasini belgilaydi.

OLISh: uchta probirka oling: tajriba, standart, nazorat.

Barcha probirkalarni suv hammomiga 100°C 5 minutga joylashtiring.

Sovutish va 500-560 nm da nazoratga qarshi so'nishni o'lchash; kyuvetka 10 mm. O'lchovlar 15 daqiqa ichida amalga oshiriladi.

NATIJA:

Yakuniy Natija: formula bo'yicha hisoblanadi:

X = ----- x 16,65 = mmol/l

bu erda X - karbamid konsentratsiyasi, mmol/l.

A 1 - eksperimental namunaning yo'q bo'lib ketishi (Exo).

A 2 - standart namunaning yo'qolishi (Ex st.).

HISOBLASH:

KLINIK DIAGNOSTIK QIYMAT.

Kattalardagi qon zardobida karbamidning normal miqdori 2,5 - 8,32 mmol / l; siydikda 333 - 582 mmol / kun.

Qon zardobida karbamid kontsentratsiyasining biroz oshishi proteinli ovqatlarning ortiqcha ovqatlanishi va qarish bilan kuzatiladi.

Qon zardobida (uremiya) karbamid kontsentratsiyasining sezilarli darajada oshishi buyrak etishmovchiligi, suvsizlanish (qusish, diareya), shok, oqsil parchalanishining kuchayishi va sepsis bilan kuzatiladi.

Qon zardobida karbamid miqdorining kamayishi parenximal gepatit, siroz (jigarning karbamid hosil qiluvchi funktsiyasining keskin pasayishi), eklampsiya va homiladorlik paytida kuzatiladi.

Siydikdagi karbamid miqdorining kamayishi nefrit, atsidoz, parenximal sariqlik va jigar sirrozida kuzatiladi.

Xulosa:

Sana ________________

Dars № 31

MUSTAQIL AUDITOR ISHI

MAVZU BO'YICHA “AMINOKSLOTALAR METABOLIZASI VA FUNKSIYASI. nukleotid almashinuvi"

Mustaqil ish uchun vazifalar:

1.Aminokislotalar almashinuvining metabolik xaritasini tuzing.

Xaritada belgilang:

2.1. To'qimalarda aminokislotalarning manbalari.

2.2. To'qimalarda aminokislotalarni o'zgartirish yo'llari.

2.3. Glikolizning tartibga soluvchi fermentlari, glikogen almashinuvi, glyukoneogenez, pentozafosfat yo'li.

2.4. Vitaminga bog'liq fermentlar.

Vaziyatli muammolarni hal qilish va muhokama qilish.

Sana: ________________

33-DARS

ISH № 1. BILIRUBINNI SIFATLI VA MAQDDDAN ANIQLASH (JENDRASZIK USULI BILAN)

ISHNING ASLI. Qizil qon hujayralari nobud bo'lganda (odamlarda 100-120 kundan keyin) gemoglobin suyak iligi, taloq va jigarning retikuloendotelial tizimi hujayralarida parchalanadi. Gem parchalanishining yakuniy mahsuloti bilvosita bilirubin bo'lib, u qonga kiradi va albumin bilan jigarga o'tadi va u erda to'g'ridan-to'g'ri bilirubin hosil qilish uchun neytrallanadi.

Qon zardobida ikki xil bilirubin mavjud. Asosiy shakli bilvosita (erkin) bilirubin bo'lib, u glyukuron kislotasi bilan bog'liq emas va bilvosita diazoreaktsiyani beradi. Qonda oz miqdorda to'g'ridan-to'g'ri (bog'langan) bilirubin mavjud - bu bilirubin glyukuronat bilan bog'langan va to'g'ridan-to'g'ri diazoreaktsiyani beradi. Ikkala pigmentning yig'indisi umumiy bilirubinni beradi.

Bilirubin almashinuvining buzilishi sariqlikning rivojlanishi bilan birga keladi. Shu munosabat bilan qon zardobidagi umumiy, to'g'ridan-to'g'ri va bilvosita bilirubinni alohida miqdoriy aniqlash turli xil sariqlik turlarini differentsial tashxislash uchun muhimdir.

Usul printsipi: Diazoreagent to'g'ridan-to'g'ri bilirubin bilan pushti rang beradi. Bilvosita bilirubin sarumga kofein reagentini qo'shib eruvchan holatga aylanadi, shundan so'ng umumiy bilirubin diazoreaktsiya bilan aniqlanadi. Rangning intensivligi namunadagi bilirubin kontsentratsiyasiga to'g'ridan-to'g'ri proportsionaldir.

OLISh: uchta probirka oling: tajriba 1, 2 va nazorat.

O'lchov			NAZORAT
	BILIRUBIN	BILIRUBIN
QON SARUM Kofein diazoreaktiv

Naychalarning tarkibini aralashtiring va inkubatsiya qiling

18 ° C haroratda.

SINOV 1 HAQIDA - 10 daqiqadan so'ng fotometriya

nazoratga qarshi

2-TAJRIB - 20 daqiqadan so'ng fotometriya

To'lqin uzunligi: 530-550 nm, 5 mm kyuvet.

NATIJA:

Yakuniy Natija: kalibrlash grafigidan topilgan. Umumiy va to'g'ridan-to'g'ri bilirubin miqdori o'rtasidagi farq bilvosita bilirubin darajasini aniqlaydi.

KLINIK DIAGNOSTIK QIYMAT.

Qon zardobidagi umumiy bilirubinning normal miqdori 5,0 - 20,5 mkmol/l; bog'langan bilirubin (to'g'ridan-to'g'ri) – 1,0 - 7,5 mkmol/l; erkin bilirubin (bilvosita) - 1,7 - 17,1 mkmol / l.

Yangi tug'ilgan chaqaloqlarda sariqlik, gepatotsitlarning shikastlanishi (yallig'lanish, toksik), o't yo'llarining tiqilib qolishi va gemolitik kasalliklarda qon zardobida umumiy bilirubinning ko'payishi kuzatiladi.

At parenximal sariqlik:

Qonda bevosita va bilvosita bilirubin miqdori ortadi;

Siydikda bevosita bilirubin va urobilinogen paydo bo'ladi.

At obstruktiv(mexanik) sariqlik:

Qonda to'g'ridan-to'g'ri bilirubin darajasi oshadi;

Siydikda bevosita bilirubin (qora siydik) paydo bo'ladi;

Sterkobilinning (rangsiz najas) chiqishi kamayadi.

At gemolitik sariqlik:

Qonda bilvosita bilirubin miqdori ortadi;

Siydikda sterkobilinogen miqdori ortadi;

Sterkobilin (qora najas) sekretsiyasi kuchayadi.

Xulosa:

Qon zardobidagi karbamid miqdori 20-40 mg% yoki 2,5-8,32 m mol / l ni tashkil qiladi.

Laboratoriya ishi No15

S vitamini miqdorini aniqlash

Qon zardobida

Usulning printsipi: qon zardobida S vitamini miqdorini aniqlash uning ishqoriy muhitda ko'k, kislotali muhitda qizil bo'lgan 2,6-diklorfenolindofenolni kamaytirish qobiliyatiga asoslanadi.

Ishning borishi: Proteinlarni cho'ktirish uchun 5 ml qon zardobiga teng hajmdagi 20% sulfosalitsil kislotasi qo'shiladi. Cho‘kmaga tushgan oqsil filtrlanadi, 6 ml filtrat titrlash kolbasiga quyiladi (bu 3 ml qon zardobiga to‘g‘ri keladi) va mikrobyuretada 0,001 n 2,6-diklorfenolindofenol eritmasi bilan pushti rang hosil bo‘lmaguncha titrlanadi. 30 soniya ichida yo'qoladi. Quyidagi formuladan foydalanib, qondagi S vitamini miqdorini hisoblang:

g ekviv. vitamin C x A x 100

X= _________________________________ = mg %

G - ekviv. C vitaminining gramm ekvivalenti C = 88

N - 2,6-diklorfenolindofenol eritmasining normalligi = 0,001

A - titrlash uchun sarflangan 2,6-diklorfenolindofenolning ml miqdori.

B - tajribaga olingan ml sarum soni (3 ml)

mg% ga aylantirish uchun 100-koeffitsient

Oddiy: 0,8-1,2 mg%.

Laboratoriya ishi No16 Siydikdagi vitamin C miqdorini aniqlash

Siydikdagi S vitaminining tarkibini aniqlash ushbu vitaminning organizmdagi zahiralari haqida tasavvurga ega bo'ladi, chunki qondagi S vitamini konsentratsiyasi va siydik bilan chiqariladigan ushbu vitamin miqdori o'rtasida muvofiqlik mavjud.

Ishning borishi: Konussimon kolbaga 10 ml siydik va 10 ml distillangan suv o‘lchanadi, aralashtiriladi, 1 ml konsentrlangan sirka kislotasi bilan kislotalanadi va 0,001 n 2,6-diklorfenolindofenol eritmasi bilan rangi pushti rangga kirguncha titrlanadi.

S vitamini tarkibini formuladan foydalanib hisoblang:

0,088 x A x 1500

X=________________= mg/kun

A - titrlash uchun sarflangan 0,001 n 2,6 dixlorfenolindofenol eritmasining ml miqdori.

10 - titrlash uchun olingan siydik miqdori

1500 - olingan siydikning taxminiy miqdori.

Norm: 10-20 mg / kun.

Laboratoriya ishi No17 Veltmanning koagulyatsiya testi

Usul qiymati: Qon zardobini kolloid tizim sifatida ifodalash mumkin, uning barqarorligi qonning oqsil fraktsiyalari tarkibiga va ular orasidagi nisbatga bog'liq. Albomlar, kichik molekulyar o'lchamdagi va aniq elektr xususiyatlariga ega bo'lgan oqsillar barqarorlikni oshirdi. zaryad va yuqori hidratsiya darajasi. Globulinlarda katta molekulyar o'lchamlar pastroq zaryad va past darajadagi hidratsiya bilan birlashtiriladi. Bu xususiyatlar tufayli globulinlarning barqarorligi sezilarli darajada past bo'ladi. Qon zardobining kolloid barqarorligi albumin fraktsiyasining kamayishi, jigar kasalliklari (gepatit, siroz, jigarning o'tkir sariq atrofiyasi), gemolitik holatlar bilan kamayadi. Bundan tashqari, qon zardobining barqarorligini kamaytiradigan gamma-globulinlar miqdori ortishi bilan koagulyatsiya testi kamayadi, deb ishoniladi. Namuna ko'payishi o'tkir yallig'lanish va ekssudativ jarayonlarda, alfa va beta-globulinlar soni ortib, sarum barqarorligini oshirganda (revmatizmning ekssudativ fazasi, o'pka silining faol jarayoni, xavfli o'smalar, katta suyuqlik yo'qotilishi, o'tkir yuqumli kasalliklar) kuzatiladi. . Klinik diagnostika laboratoriyalarida qon zardobidagi oqsillar tarkibidagi o'zgarishlarni koagulyatsion reaktsiyalar bilan aniqlaydigan usullar keng qo'llaniladi. Ushbu usullardan biri Veltman koagulyatsiya testidir.

Usulning printsipi: Yuqori molekulyar birikmalar (oqsillar) eritmalarining barqarorligi ikki omilga bog'liq: molekulalar zaryadining kattaligi va ularning solvatlanish darajasi. Veltman testida qon zardobidagi oqsillarning koagulyatsiyasini olish uchun elektrolit sifatida molekulalarning zaryadini va termal denaturatsiyani kamaytiradigan CaCI2 eritmasi qo'llaniladi, buning natijasida oqsil molekulalari hidrofobik xususiyatlarga ega bo'lib, hidratsion qobig'ini yo'qotadi.

Ishning borishi: 0,1 ml qon zardobiga 4,9 ml distillangan suv solinadi, aralashtiriladi va 0,1 ml CaCI2 eritmasidan solinadi, chayqatiladi va olovda qizdirilsin.

qaynash. Protein koagulyatsiyasi paydo bo'lishi uchun salqin va yorug'likda kuzating. Agar oqsillar koagulyatsiya qilinmasa, yana 0,1 ml CaCI2 qo'shing va yana qaynatiladi. Jarayon oxirigacha takrorlanadi

yoriqlar tushguncha. Natijalar reaktsiya uchun sarflangan 0,5% CaCI2 eritmasining umumiy miqdorini hisoblash yo'li bilan baholanadi. Odatda, reaksiya 0,4-0,5 ml CaCI2 qo'shilganda sodir bo'ladi.

8-sonli ish Qon zardobida va siydikda karbamid miqdorini diatsetil monooksim bilan rangli reaksiya orqali aniqlash.

Usulning printsipi.

Karbamid tiosemikarbazid va temir ionlari ishtirokida kuchli kislotali muhitda diatsetil monooksim bilan qizil rangli kompleks hosil qiladi.

Reaktivlar.

1. Standart eritma (10 ml)

karbamid 16,65 mmol/l

2. Diasetil monooksim (10 tabletka)

har bir tabletkada diatsetil monooksim 0,5 mmol, tiosemikarbazid mavjud

0,08 mmol, temir tuzi 2,5 mkmol.

Reaksiya aralashmasining tarkibi.

Diasetil monooksim 5,0 mmol/l

Tiosemikarbazid 0,9 mmol/l

Sulfat kislota 0,9 mol/l

Temir tuzi 25,0 mkmol/l

Sarum / reaktsiya aralashmasi nisbati 1/121

Ishchi yechimlarni tayyorlash.

Yechim 1. 50 ml hajmli o'lchov kolbasida 30 ml distda eritiladi. yuqori haroratda suv, reaktivning bir tabletkasi 2. Sovutgandan so'ng, belgiga suv qo'shing. Kichik erimaydigan cho'kma mavjudligi aniqlashga xalaqit bermaydi.

Barqarorlik: bir necha oy (+15 dan +25 C gacha).

Yechim 2. 1-eritmaning 1 qismini sulfat kislota eritmasining 1 qismi bilan aralashtirib tayyorlang.

Qarshilik: 1 kun (+15 dan +25 C gacha).

Tahlil o'tkazish.

To'lqin uzunligi (490-540) nm

Kyuvetlar 1 sm

Harorat (+15 dan +25 C gacha)

Uchta yupqa devorli probirkalarda 2-eritma 200+1 nisbatda zardob yoki suyultirilgan siydik (namuna), 1-reaktiv (standart) yoki distillangan suv (nazorat eritmasi) bilan aralashtiriladi va tarkibi aralashtiriladi. Tahlil qilishdan oldin siydik dist bilan suyultiriladi. suv 1 + 50 dan 1 + 100 gacha (natija x suyultirish).

Hisoblash.

Karbamid (mmol/l) = 16,65 x (A 1 / A 2)

Ogohlantirish.

Siydik: 333,0 - 582,8 mmol/kun.

Usulning printsipi

Karbamid tiosemikarbazid va temir ionlari ishtirokida kuchli kislotali muhitda diatsetil monooksim bilan qizil rangli kompleks hosil qiladi.

Kerakli reaktivlar

1. Trixloroasetik kislota, 100 g/l.

2. Diasetil monooksim, 25 g/l suvli eritma. Reagent barqaror.

3. Tiosemikarbazid, 2,5 g/l suvli eritma. Reagentni tayyorlash uchun siz tiosemikarbazid gidroxloridini ham ishlatishingiz mumkin; ikkinchisi 3,2 g/l suvli eritma shaklida ishlatiladi. Ikkala reagent ham xona haroratida qorong'i idishda saqlanganda barqaror bo'ladi.

4. Konsentrlangan sulfat kislota.

5. Ortofosfor kislotasi 85%.

6. Temir xlorid. Temir xlorid eritmasi: 5 g temir xlorid 100 ml suv bilan suyultiriladi va 1 ml konsentrlangan sulfat kislota qo'shib kislotalanadi. Asosiy eritmadan temir xloridning ishchi eritmasi tayyorlanadi: 1 ml temir xloridning asosiy eritmasi suv bilan 100 ml ga keltiriladi, keyin 8 ml konsentrlangan sulfat kislota va 1 ml 85% fosfor kislotasi qo'shiladi.
Qorong'i idishda saqlang. Eng yaxshisi 2 hafta.

7. Benzoy kislotasi, 2 g/l. 0,2 g kristalli benzoy kislotasi 100 ml suvda suv hammomida kuchli aralashtirish bilan eritiladi.

8. Kalibrlash eritmasini tayyorlash uchun karbamid. 7 mmol/l karbamid eritmasini tayyorlang: 42 mg karbamid 100 ml hajmli o'lchov kolbasida suvda eritiladi. Erituvchi sifatida 2 g/l benzoik kislota eritmasidan foydalanish mumkin. Benzoik kislota eritmasi bilan tayyorlangan kalibrlash eritmasi suvga qaraganda ancha barqaror; 1 ml kalibrlash eritmasida 0,007 mmol karbamid mavjud.

9. Rangli reaktiv: 30 ml temir xlorid ishchi eritmasiga 20 ml suv, 1 ml 25 g/l diatsetil monooksim eritmasi va 0,25 ml 2,5 g/l tiosemikarbazid eritmasi qo'shiladi. Rangli reagent har safar ishlatishdan oldin tayyorlanadi.

Qon zardobida karbamid miqdorini aniqlashdagi muvaffaqiyat

Tajriba sinovi: sentrifuga naychasiga 0,8 ml suv, 0,2 ml sarum va 1 ml 100 g/l triklorosirka kislota eritmasidan quyiladi va aralashtiriladi.
15-20 daqiqadan so'ng santrifüj qiling. Toza probirkaga 0,5 ml suyuqlik va 5 ml rangli reagent qo'shing. Probirka 20 daqiqa davomida qaynayotgan suv hammomida saqlanadi, keyin 2-3 daqiqa davomida oqadigan suv ostida sovutiladi. O'lchov 530-560 nm (yashil filtr) to'lqin uzunligidagi fotometrda qatlam qalinligi 1 sm bo'lgan kyuvetada bo'sh namunaga nisbatan amalga oshiriladi, ammo bo'sh namuna xuddi shunday tarzda joylashtiriladi supernatant suyuqlik o'rniga 0,5 ml suv olinadi.

Hisoblash kalibrlash namunasi bilan solishtirish orqali formula bo'yicha amalga oshiriladi. Kalibrlash namunasi tajriba namunasi bilan bir xil tarzda joylashtiriladi, lekin sarum o'rniga 0,2 ml kalibrlash eritmasi olinadi.

Karbamid konsentratsiyasi, mmol/l:

Eop / Ek ̧ Sk,

Bu erda Eop eksperimental namunaning yo'q bo'lib ketishi;

Sk - kalibrlash eritmasida karbamid konsentratsiyasi, 7 mmol/l.
Siydikdagi karbamidni aniqlash qon zardobidagi karbamidni aniqlashga o'xshash tarzda amalga oshiriladi, ammo sarum o'rniga 0,2 ml suyultirilgan siydik olinadi.
Bunga parallel ravishda kalibrlash namunasini qon zardobidagi karbamidni aniqlash uchun tavsiflanganidek qayta ishlang.

Siydikning kunlik miqdori uchun karbamidni hisoblash quyidagi formula bo'yicha amalga oshiriladi:

Msut = Sk ̱ Eop ̧ a ̧ K / Ek ̧ b,

Bu erda Msut - kunlik siydikdagi karbamid miqdori, mmol;

Eop - eksperimental namunaning yo'q bo'lib ketishi;

Ek - kalibrlash namunasining yo'qolishi;

A - siydikning kunlik miqdori, ml;

B - tahlil qilish uchun olingan siydik miqdori, ml;

K - siydikni suyultirish koeffitsienti.

Eslatmalar

1. O'lchov ranglarning beqarorligi tufayli namunalarni sovutgandan keyin 15 daqiqadan kechiktirmasdan amalga oshiriladi.

2. Diasetil monooksim bilan karbamid rangli kompleksining beqarorligi va rangning isitish sharoitlariga bog'liqligi tufayli kalibrlash namunasi har bir tajriba seriyasiga parallel ravishda aniqlanadi.

3.
Agar qon zardobidagi karbamid miqdori 17 mmol / l dan yuqori bo'lsa, sarum natriy xloridning izotonik eritmasi bilan suyultiriladi va natijalar suyultirish omiliga ko'paytiriladi.

4. Karbamid azotiga aylantirish uchun natijalarni 2.14 ga bo'lish kerak.

(diatsetil monooksim usuli)

Karbamid ammiakni neytrallash jarayonida jigarda hosil bo'lgan mahsulotdir. Karbamid oqsil almashinuvining asosiy yakuniy mahsulotidir. Qonda oqsil bo'lmagan, qoldiq azotning taxminan 50% karbamiddir.

Usul printsipi: karbamid tiosemikarbazid va temir ionlari ishtirokida kuchli kislotali muhitda diatsetil monooksim bilan qizil rangli kompleks birikma hosil qiladi, rang intensivligi uning konsentratsiyasini belgilaydi.

OLISh: uchta probirka oling: tajriba, standart, nazorat.

Barcha probirkalarni suv hammomiga 100°C 5 minutga joylashtiring.

Sovutish va 500-560 nm da nazoratga qarshi so'nishni o'lchash; kyuvetka 5 mm. O'lchovlar 15 daqiqa ichida amalga oshiriladi.

NATIJA:

C st = 16,65 mmol/l.

Yakuniy Natija: formula bo'yicha hisoblanadi:

op bilan = ----- · 16,65 = mmol/l.

Kattalardagi qon zardobida karbamidning normal miqdori 2,5 - 8,33 mmol / l; siydikda 333 - 582 mmol / kun. Yangi tug'ilgan chaqaloqlarda qon zardobidagi karbamidning normal miqdori 3,5 - 11 mmol/l, 2-14 yoshli bolalarda 2,5 - 8,33 mmol/l ni tashkil qiladi.

Qon zardobida karbamid kontsentratsiyasining biroz oshishi proteinli ovqatlarning ortiqcha ovqatlanishi va qarish bilan kuzatiladi.

Qon zardobida (uremiya) karbamid kontsentratsiyasining sezilarli darajada oshishi buyrak etishmovchiligi, suvsizlanish (qusish, diareya), shok, oqsil parchalanishining kuchayishi va sepsis bilan kuzatiladi.

Qon zardobida karbamid miqdorining kamayishi parenximal gepatit, siroz (jigarning karbamid hosil qiluvchi funktsiyasining keskin pasayishi), eklampsiya va homiladorlik paytida kuzatiladi.

Siydikdagi karbamid miqdorining kamayishi nefrit, atsidoz, parenximal sariqlik va jigar sirrozida kuzatiladi.

Xulosa:

Sana ________________

31-DARS

MUSTAQIL AUDITOR ISHI

MAVZU BO'YICHA “AMINOKSLOTALAR METABOLIZASI VA FUNKSIYASI. nukleotid almashinuvi"

Mustaqil ish uchun vazifalar:

1. 1.Aminokislotalar almashinuvining metabolik xaritasini tuzing.

2. Xaritada belgilang:

2.1. To'qimalarda aminokislotalarning manbalari.

2.2. To'qimalarda aminokislotalarni o'zgartirish yo'llari.

2.3. Glikolizning tartibga soluvchi fermentlari, glikogen almashinuvi, glyukoneogenez, pentozafosfat yo'li.

2.4. Vitaminga bog'liq fermentlar.

3. Vaziyat masalalarini yechish va muhokama qilish.

Sana: ________________

33-DARS

1-sonli ish.
(JENDRASZIK METOD BO'YICHA)

ISHNING ASLI. Qizil qon hujayralari nobud bo'lganda (odamlarda 100-120 kundan keyin) gemoglobin suyak iligi, taloq va jigarning retikuloendotelial tizimi hujayralarida parchalanadi. Gem parchalanishining yakuniy mahsuloti bilvosita bilirubin bo'lib, u qonga kiradi va albumin bilan jigarga o'tadi va u erda to'g'ridan-to'g'ri bilirubin hosil qilish uchun neytrallanadi.

Qon zardobida ikki xil bilirubin mavjud. Asosiy shakli bilvosita (erkin) bilirubin bo'lib, u glyukuron kislotasi bilan bog'liq emas va bilvosita diazoreaktsiyani beradi. Qonda oz miqdorda to'g'ridan-to'g'ri (bog'langan) bilirubin mavjud - bu bilirubin glyukuronat bilan bog'langan va to'g'ridan-to'g'ri diazoreaktsiyani beradi. Ikkala pigmentning yig'indisi umumiy bilirubinni beradi.

Bilirubin almashinuvining buzilishi sariqlikning rivojlanishi bilan birga keladi. Shu munosabat bilan qon zardobidagi umumiy, to'g'ridan-to'g'ri va bilvosita bilirubinni alohida miqdoriy aniqlash turli xil sariqlik turlarini differentsial tashxislash uchun muhimdir.

Usul printsipi: Diazoreagent to'g'ridan-to'g'ri bilirubin bilan pushti rang beradi. Bilvosita bilirubin sarumga kofein reagentini qo'shib eruvchan holatga aylanadi, shundan so'ng umumiy bilirubin diazoreaktsiya bilan aniqlanadi. Rangning intensivligi namunadagi bilirubin kontsentratsiyasiga to'g'ridan-to'g'ri proportsionaldir.

OLISh: uchta probirka oling: tajriba 1, 2 va nazorat.

Naychalarning tarkibini aralashtiring va inkubatsiya qiling

18 o C haroratda.

1-TAJRIB - 10 minutdan keyin fotometriya

Nazoratga qarshi

2-TAJRIB - 20 daqiqadan so'ng fotometriya

To'lqin uzunligi: 530-550 nm, 5 mm kyuvet.

NATIJA:

Yakuniy Natija: kalibrlash grafigidan topilgan. Umumiy va to'g'ridan-to'g'ri bilirubin miqdori o'rtasidagi farq bilvosita bilirubin darajasini aniqlaydi.

To'g'ridan-to'g'ri bilirubin:

C = mkmol/l

Umumiy bilirubin:

C = mkmol/l

Bilvosita bilirubin:

C = mkmol/l

KLINIK DIAGNOSTIK QIYMAT.

Kattalardagi qon zardobidagi umumiy bilirubinning normal miqdori 5,0 - 20,5 mkmol/l ni tashkil qiladi; bog'langan bilirubin (to'g'ridan-to'g'ri) – 1,0 - 7,5 mkmol/l; erkin bilirubin (bilvosita) – 1,7 - 17,1 mkmol/l.

Yangi tug'ilgan chaqaloqlarda qon zardobidagi umumiy bilirubinning normal miqdori 12-20 mkmol/l, 2-14 yoshli bolalarda esa 8,55-20,52 mkmol/l ni tashkil qiladi.

Yangi tug'ilgan chaqaloqlarda sariqlik, gepatotsitlarning shikastlanishi (yallig'lanish, toksik), o't yo'llarining tiqilib qolishi va gemolitik kasalliklarda qon zardobida umumiy bilirubinning ko'payishi kuzatiladi.

At parenximal sariqlik:

Qonda bevosita va bilvosita bilirubin miqdori ortadi;

Siydikda bevosita bilirubin va urobilinogen paydo bo'ladi.

Sterkobilinning najas bilan chiqishi kamayadi.

At obstruktiv(mexanik) sariqlik:

Qonda to'g'ridan-to'g'ri bilirubin darajasi oshadi;

Siydikda bevosita bilirubin (qora siydik) paydo bo'ladi;

Sterkobilin (axolik najas) sekretsiyasi yo'q.

At gemolitik sariqlik:

Qonda bilvosita bilirubin miqdori ortadi;

Siydikda sterkobilinogen miqdori ortadi;

Sterkobilin (qora najas) sekretsiyasi kuchayadi.

Xulosa:

Sana ______________

34-DARS

Tegishli ma'lumotlar.