Sitogenetik usul qo'llaniladi. Tibbiy biologiya

Hujayraning irsiy tuzilmalarini - xromosomalarni mikroskopik o'rganish usuli. Bu karyotiplash va jinsiy xromatinni aniqlashni o'z ichiga oladi.

a) Kariotiplash metafaza xromosomalarini olish uchun amalga oshiriladi.

Karyotip- Bu metafaza bosqichidagi somatik hujayralardagi xromosomalarning diploid to'plami, ushbu turga xosdir.

Diagrammada keltirilgan karyotipga idiogramma, karyogramma yoki xromosoma kompleksi deyiladi.

Karyotiplash uchun hujayralarning eng qulay manbai limfotsitlardir (periferik qon hujayralari). Birinchidan, etarli miqdordagi bo'linuvchi hujayralar olinadi (PHA stimulyatsiyasi), so'ngra alohida xromosomalar (gipotonik eritma) bilan metafaza plitalari (metafaza bosqichida bo'linishni to'xtatish uchun kolxisin ishlatiladi). Preparatlar bo'yaladi va suratga olinadi, xromosomalar kesiladi va yotqiziladi.

Xromosomalarni tizimlashtirish uchun ikkita standart tasnif qo'llaniladi: Denver va Parij. Denver tasnifi ikkita tamoyilga asoslanadi: xromosomalarning uzunligi va ularning shakli (metatsentrik, submetasentrik, akrosentrik), qattiq xromosomalarni rang berish usulidan foydalanganda. Ushbu tasnifga ko'ra, barcha xromosomalar etti guruhga bo'linadi, har bir juft xromosoma o'z raqamiga ega. Tasniflashning nochorligi guruh ichidagi xromosomalarni aniqlashning qiyinligidir.

Parij tasnifi metafaza xromosomalarini differentsial bo'yashga asoslangan. Har bir xromosoma o'zining individual naqshiga ega, uzunligi ochiq va qorong'i chiziqlarga - disklarga (segmentlarga) aniq farqlanadi. Xromosomalarning chiziqli differentsiatsiyasi (xromosoma soni, elka, mintaqa, segment) uchun belgilash tizimi ishlab chiqilgan.

b) X-jinsiy xromatinini aniqlash.

Jinsiy xromatin (Barr tanasi)- oddiy ayollarda somatik hujayralarning interfaza yadrosida joylashgan ixcham qorong'i bo'lak. Jinsiy xromatin - bu o'ralgan X xromosoma. X xromosomalaridan birining inaktivatsiyasi erkak va ayol tanasidagi genlar muvozanatini tenglashtiradigan mexanizmdir. Mariya Lionning gipotezasiga ko'ra, X xromosomasining inaktivatsiyasi embrionogenezning dastlabki bosqichlarida (14-kun) sodir bo'ladi, bu tasodifiy va faqat X xromosomasining uzun qo'llari inaktivlanadi. Jinsiy xromatin bo'laklari soni bo'yicha X xromosomalari sonini aniqlash mumkin (formula n + 1, bu erda n - Barr tanasining soni). X xromosomalarining har qanday soni uchun faqat bitta X xromosoma faol bo'ladi. Sitogenetik usullar xromosoma kasalliklarini aniqlash (xromosomalar soni va tuzilishining o'zgarishi), jinsni aniqlash, populyatsiyalar a'zolarining xromosoma polimorfizmini o'rganish uchun ishlatiladi.

Sitogenetik usul quyidagilar uchun qo'llaniladi:

inson karyotipini o'rganish

xromosoma kasalliklari diagnostikasi

gen va xromosoma mutatsiyalarida turli moddalarning mutagen ta'sirini o'rganish

xromosomalarning genetik xaritasi

Bosqichlar:

1. Ozuqa muhitida qon hujayralarini yetishtirish

2. Mitotik bo'linishlarning stimulyatsiyasi

3. Shpindel iplarini yo'q qilish uchun kolxisin qo'shish, metafaza bosqichida bo'linishni to'xtatish

4. Xromosomalarning erkin joylashishi uchun hujayralarni gipotonik eritma bilan davolash

5. Rang berish

6. Mikroskopiya va fotografiya

7. Idiogramma tuzish

Tug'ma kasalliklarni sifatli o'z vaqtida tashxislash, onkologik patologiyalarga moyillik, sitogenetik tadqiqot qo'llaniladi.

Zamonaviy texnika va eng yangi jihozlar yordamida homilaning xromosoma to‘plami o‘rganiladi.

Xromosoma apparatida aniqlangan anomaliyalar bola tug'ilishidan oldin ham mumkin bo'lgan patologiyalarni aniqlash va oldini olish imkonini beradi.

Ushbu protsedura murakkab va ko'p bosqichli, shuning uchun har bir individual diagnostika muammosini hal qilish uchun o'zining sitogenetik maxsus tekshiruvi talab qilinadi.

Sitogenetik tadqiqotlar irsiy omillar va inson somatik hujayralarining yadro tuzilmalari o'rtasidagi munosabatlarni o'rganadi.

Ushbu tahlil usullari biologiya va tibbiyotda tirik mavjudotlarning filogenez va ontogenez davridagi kelib chiqishi, evolyutsiyasi, oʻzgaruvchanligini aniqlashda keng qoʻllaniladi.

Shaxsiy genetik xususiyatlarga alohida e'tibor beriladi. Shuning uchun sitogenetik tadqiqot usuli ishlaydigan asosiy mavzu bu odamlar, hayvonlar va o'simliklarning xromosoma to'plamidir.

Xromosomalardagi o'zgarishlar, irsiy bo'lib, organizmning xususiyatlarini, turli kasalliklarga moyilligini, noqulay muhit omillariga chidamliligini belgilaydi.

Ayrim kasalliklarning tarqalishini aniqlaydigan xromosomalar, shuning uchun ularning to'plami va tarkibiy o'zgarishlari bilan ma'lum bir odamning onkologik va boshqa jiddiy kasalliklarning rivojlanishiga moyilligini ko'rish mumkin.

Sitogenetik tahlil va tadqiqotlar natijasida xromosomalarning turli strukturaviy oʻzgarishi, xromosoma anomaliyalari aniqlanadi.

Bunday usullar xavfli kasalliklarni rivojlanishining dastlabki bosqichlarida zamonaviy diagnostika qilish uchun qo'llaniladi.

Homiladorlikning dastlabki bosqichlarida homila xromosomalarini sitogenetik o'rganishdan foydalanish tug'ilmagan bolaning jinsini hujayra darajasida aniqlash imkonini beradi.

So'nggi avlodning yuqori texnologiyali uskunalari, tasdiqlangan tadqiqot usullari onkologik kasalliklar va genetik patologiyalarni aniqlash va oldini olish imkonini beradi.

To'g'ri tashxis ijobiy terapevtik natijaga hissa qo'shadigan eng maqbul davolash taktikasini aniqlash imkonini beradi.

Bunday protseduraning muvaffaqiyati jihozlarning sifati, aniqligi, malakasi va tibbiyot xodimlarining tajribasiga bog'liq.

To'g'ri xromosoma tahlili ma'lumotlari keyingi barcha davolanishning muvaffaqiyatini aniqlaydi, shuning uchun birinchi marta to'g'ri natijalarga erishishga harakat qilish kerak.

Ba'zida bu turdagi tashxis yagona mumkin. Ushbu tadqiqot texnologiyasi natijalarning ishonchliligini oshirib, turli usullar bilan tekshiriladigan ko'p sonli DNK nusxalarini yaratishga imkon beradi.

Erta tashxis qo'yilgan kasallikni davolash ancha oson va samarali tezkor terapiya ko'pincha hayotni saqlab qoladi.

Karyotip tadqiqoti

Xromosomalar to'plami (karyotip) tahlil qilish uchun turli xil biologik materiallardan foydalanadigan bir necha usullar bilan o'rganiladi.

Karyotipni o'rganish ko'pincha venoz qon bilan ishlaydi, u sinov naychasida lityum va geparin bilan aralashtiriladi.

Qon 2 ml miqdorida olinadi, undan keyin u 3 kun davomida ozuqaviy muhitda saqlanadi. Shundan keyingina hosil bo'lgan material o'rnatiladi va mikroskop ostida tekshiriladi.

Xromosomalarni tahlil qilishdan bir oy oldin siz antibiotiklarni qabul qilishni to'xtatishingiz kerak, bundan tashqari, sovuqqonlik uchun bunday tartiblar bajarilmaydi.

Karyotip tadqiqotlari (karyotiplash) maxsus binoni yordamida yorug'lik mikroskopi yordamida xromosomalarning shakli, hajmi, sonini tahlil qiladi. Erkaklar uchun normal ko'rsatkichlar 46, XY, ayollar uchun esa - 46, XX bilan belgilanadi.

Karyotiplash xromosoma uzilishlari bilan bog'liq bo'lgan genetik materialdagi strukturaviy anormalliklarni tekshiradi. Ushbu halokat turli xil nosog'lom g'ayritabiiy kombinatsiyalar bilan qoplanadi.

Zamonaviy tibbiy texnologiyalarning rivojlanishi bilan xromosomalardagi bunday patologik o'zgarishlarni samarali aniqlaydigan yangi sitogenetik tadqiqot usullari paydo bo'ladi.

Agar inson embrionining rivojlanishida genetik anormalliklarga shubha bo'lsa, unda homilaning sitologik tahlili alohida o'tkaziladi.

Yaxshi jihozlar va malakali xodimlarga ega zamonaviy tibbiyot markazlari turli xil nuqsonlar, xromosoma kasalliklarini aniqlaydi va bolani xavfsiz olib borish qobiliyatini juda yuqori aniqlik bilan aniqlaydi.

Agar gematopoetik tizim organlarining onkologik kasalliklariga shubha bo'lsa, u holda suyak iligining sitologik tekshiruvi buyuriladi.

Bunday tahlillar faqat maxsus jihozlar va malakali xodimlarga ega bo'lgan tibbiyot muassasalarida amalga oshiriladi.

Buning sababi, tahlil va tadqiqot uchun biologik material to'plash sog'liq va hayot uchun xavf bilan bog'liq.

Homiladorlikning 3-4 oyligida homilaning xromosoma kasalliklarini istisno qilish uchun xorionik tahlil o'tkaziladi, u gematopoetik tizimning kamida 20 hujayralarini tekshiradi.

Bunday testlar Hunter kasalligi, Daun sindromi va boshqa ko'plab kasalliklar kabi patologiyalarni taxmin qilishga yordam beradi.

Onkologik jarayonlar davomida xromosomalar to'plamidagi o'zgarishlar saratonni erta tashxislash uchun ishlatilishi mumkin, shuning uchun texnik taraqqiyotning o'sishi bilan sitologik darajadagi diagnostika tadqiqotlari faol rivojlanmoqda.

Kariotip va uning turlarini tahlil qilish vazifalari

Karyotipni batafsil o'rganish quyidagi aniq vazifalarni hal qilish uchun amalga oshiriladi:

• onkologik kasalliklarni optimal davolashni tayinlash uchun diagnostika asoslarini aniqlashtirish;
• bolaning tug'ma kasalliklarining sabablarini genetik darajada aniqlash;
• abort, ayollarning bepushtligining genetik sabablarini topish;
• ishda zararli omillar ta'sirining oqibatlarini aniqlash;
• homilada g'ayritabiiy xromosomalarni aniqlash.

Shunday qilib, bunday tahlil uchun ko'rsatmalar bepushtlik, homiladorlikning tugashi, xromosoma anomaliyalariga shubha qilish, jinsiy etuklikdagi ayollarda hayz ko'rishning yo'qligi, jinsiy rivojlanishning buzilishi va kechikishi hisoblanadi.

Xomilaning xromosoma anomaliyalari ko'pincha o'tkazib yuborilgan homiladorlikka olib kelishi mumkin.

Tahlil darajalariga qarab, karyotip tahlilining ikki turi mavjud:

• oddiy;
• molekulyar.

Agar normal karyotipning buzilishi inson jinsiy rivojlanishining dastlabki bosqichlarida sodir bo'lsa, u holda jinsiy hujayralarning birlashishi va zigota hosil bo'lishi bilan bunday anomaliyalar saqlanib qoladi.

Keyingi rivojlanishda embrion patologik anormal xromosomalarni saqlab qoladi. Bu holat individual rivojlanishdagi patologik o'zgarishlarga olib keladi, bu ko'pincha yaroqsiz bo'lib chiqadi.

Biroq, dastlab zigotaning bo'linishi paytida turli xil karyotiplarga ega bo'lgan bir nechta hujayra bo'linish chizig'i paydo bo'ladigan vaziyat mavjud. Bu odatiy sitogenetik tadqiqot usullarini aniqlash imkonini beradi.

Molekulyar karyotiplash inson genomini o'rganishning eng zamonaviy usuli hisoblanadi. Bunday tahlil yordamida genlar nusxalari sonining turli xil o'zgarishlarini aniqlash mumkin bo'ldi.

Bunday patologiyalar muhim genetik ma'lumotlarni o'z ichiga olgan DNK molekulalarining bo'limlarini yo'qotish bilan tavsiflanadi. Bularning barchasi aqliy zaiflik, epilepsiya, saraton, autizmga olib keladi.

Ushbu usul yordamida qayta qurish hududida joylashgan genlarni aniq aniqlash, ularning irsiy kasalliklarning rivojlanishiga bilvosita yoki bevosita hissasini aniqlash mumkin.

Bugungi kunda bu usul ko'pchilik genetik patologiyalarni aniq tashxislash uchun eng muhim vositadir.

Karyotiplash tartibi

Tananing somatik hujayralari ichidagi to'plam 23 juft xromosomalardan iborat bo'lib, ulardan biri onadan, ikkinchisi esa otadan uzatiladi, inson karyotipini ifodalaydi.

Karyotip tahlilini o'tkazish uchun qon, suyak iligi yoki inson epiteliyasidan olinishi mumkin bo'lgan har qanday hujayralar qo'llaniladi.

Hujayra tsikli davomida xromosomalarning ko'rinishi sezilarli darajada o'zgaradi. Mitozning ba'zi bosqichlarida ular yadro ichida joylashgan bo'lib, spiral shaklga ega emas, boshqalarida esa kattaroq spiral struktura hosil bo'ladi.

Tashqi kuzatish uchun hujayra bo'linishining eng mos bosqichi metafazadir. Aynan shu bosqichda xromosomalarning mikroskopik tekshiruvi o'tkazilishi mumkin.

Tadqiqot jarayoni quyidagi tartibda amalga oshiriladi:

1. Mitoz metafaza bosqichida to'xtaydi va hujayra bo'linishining tugallanmagan jarayonini tuzatuvchi kolxisinni qo'shib, izolyatsiya qilingan hujayra tuzilishi boyitiladi;
2. Bunday hujayralar bo'yaladi, mahkamlanadi va keyin mikroskop ostida suratga olinadi;
3. Homolog xromosomalarning olingan fotosuratlari tizimlashtiriladi va ma'lum bir tartibda joylashtiriladi.

Xromosomalarni differentsial bo'yash usullari paydo bo'lishi bilan ularni mikroskopik tekshirish orqali batafsilroq tafsilotlash imkoniyati paydo bo'ldi. Vaqt o'tishi bilan bu metodologiya takomillashtirildi va rivojlandi.

Ko'pgina ixtisoslashgan klinikalarda karyotipni aniqlash uchun tahlil qilishingiz mumkin. Bundan tashqari, ushbu protsedura ikki usulda amalga oshirilishi mumkin.

Birinchi holda, ota-onadan olingan xromosomalardagi miqdoriy va strukturaviy o'zgarishlar tahlil qilinadi.

Ikkinchisida xromosomalarning ichki mutatsiyalari noqulay tashqi omillar ta'sirida tahlil qilinadi.

Ko'pincha, karyotiplash bepushtlikning sabablarini aniqlash uchun turmush o'rtoqlarga tayinlanadi. Bunday holda, biologik materialni tahlil qilish uchun etkazib berish turli vaqtlarda sodir bo'lishi mumkin.

Shunday qilib, karyotiplarni tahlil qilish tibbiyotda katta ahamiyatga ega, chunki u xromosomalarning qayta tuzilishini, ularning tuzilishi va tartibining buzilishini aniqlash imkonini beradi.

Sitogenetik tekshiruvlar xromosomalar bilan bevosita bog'liq bo'lgan bir qator irsiy kasalliklarni aniqlaydi.

Sitogenetika - genetikaning hujayra va hujayra osti tuzilmalari, asosan, xromosomalar darajasidagi irsiyat va o'zgaruvchanlik qonuniyatlarini o'rganadigan bo'limi. Sitogenetik usullar xromosomalar to'plami yoki alohida xromosomalarning tuzilishini o'rganish uchun mo'ljallangan. Sitogenetik usullarning asosi inson xromosomalarini mikroskopik o'rganishdir. Inson xromosomalarini o'rganishning mikroskopik usullari 19-asrning oxirida qo'llanila boshlandi. "Sitogenetika" atamasi 1903 yilda Uilyam Satton tomonidan kiritilgan.

Sitogenetik tadqiqotlar 1920-yillarning boshidan keng qo'llanila boshlandi. XX asr inson xromosomalarining morfologiyasini o'rganish, xromosomalarni sanash, metafaza plitalarini olish uchun leykotsitlarni etishtirish uchun. 1959 yilda frantsuz olimlari D. Lejeune, R. Turpin va M. Gotier Daun kasalligining xromosoma xususiyatini aniqladilar. Keyingi yillarda odamlarda keng tarqalgan boshqa ko'plab xromosoma sindromlari tasvirlangan. 1960 yilda R. Moorhead va boshqalar. inson metafazasi xromosomalarini olish uchun periferik qon limfotsitlarini etishtirish usulini ishlab chiqdi, bu esa ma'lum irsiy kasalliklarga xos bo'lgan xromosoma mutatsiyalarini aniqlash imkonini berdi.

Sitogenetik usullarni qo'llash: insonning normal karyotipini o'rganish, genomik va xromosoma mutatsiyalari bilan bog'liq irsiy kasalliklar diagnostikasi, turli xil kimyoviy moddalar, pestitsidlar, insektitsidlar, dorilar va boshqalarning mutagen ta'sirini o'rganish Sitogenetik tadqiqotlar ob'ekti bo'lishi mumkin somatik, meyotik va interfaza hujayralari.

SITogenetik USULLAR Yorug'lik mikroskopiyasi Elektron mikroskopiya Konfokal mikroskopiya Luminesans mikroskopiya Floresan mikroskopiyasi

Sitogenetik tadqiqotlar uchun ko'rsatmalar Klinik belgilari bo'yicha xromosoma kasalliklariga shubha qilish (tashxisni tasdiqlash uchun) Bolada gen sindromi bilan bog'liq bo'lmagan ko'plab tug'ma nuqsonlarning mavjudligi Ko'p o'z-o'zidan abortlar, o'lik tug'ilishlar yoki tug'ma nuqsonli bolalar tug'ilishi Reproduktiv funktsiyalarning buzilishi ayollar va erkaklarda noma'lum kelib chiqishi funktsiyasi Bolada sezilarli aqliy zaiflik va jismoniy rivojlanish

Prenatal diagnostika (yosh bo'yicha, ota-onalarda translokatsiya mavjudligi sababli, oldingi bolaning xromosoma kasalligi bilan tug'ilishida) Xromosoma beqarorligi bilan tavsiflangan sindromlarga shubha Leykemiya (differensial diagnostika, davolash samaradorligini baholash va prognoz uchun). davolash) Har xil kimyoviy moddalar, pestitsidlar, insektitsidlar, dori-darmonlar va boshqalarning mutagen ta'sirini baholash.

Metafaza bosqichida hujayra bo'linishi davrida xromosomalar aniqroq tuzilishga ega va o'rganish uchun mavjud. Odatda, insonning periferik qoni leykotsitlari tekshiriladi, ular maxsus ozuqaviy muhitga joylashtiriladi, ular bo'linadi. Keyin preparatlar tayyorlanadi va xromosomalarning soni va tuzilishi tahlil qilinadi.

Somatik hujayralarning sitogenetik tadqiqotlari Mitotik xromosomalar preparatlarini olish Rangli preparatlar (oddiy, differensial va lyuminestsent) Molekulyar sitogenetik usullar - rangni in situ gibridlash usuli (FISH)

Klinik amaliyotda qo'llaniladigan sitogenetik usullarga quyidagilar kiradi: - kariotiplashning klassik usullari; - molekulyar sitogenetik usullar. Yaqin vaqtgacha xromosoma kasalliklari diagnostikasi an'anaviy sitogenetik tahlil usullaridan foydalanishga asoslangan edi.

Xromosomalarni o'rganish uchun ko'pincha qisqa muddatli qon madaniyati preparatlari, shuningdek, suyak iligi hujayralari va fibroblast madaniyatlari qo'llaniladi. Antikoagulyantli qon eritrotsitlarni cho'ktirish uchun sentrifuga qilinadi va leykotsitlar 2-3 kun davomida madaniy muhitda inkubatsiya qilinadi. Qon namunasiga fitohemagglutinin qo'shiladi, chunki u qizil qon hujayralarining aglutinatsiyasini tezlashtiradi va limfotsitlarning bo'linishini rag'batlantiradi. Xromosomalarni o'rganish uchun eng mos bosqich mitozning metafazasidir, shuning uchun bu bosqichda limfotsitlarning bo'linishini to'xtatish uchun kolxitsin qo'llaniladi. Ushbu preparatning kulturaga qo'shilishi metafazadagi hujayralar ulushining oshishiga olib keladi, ya'ni xromosomalar eng yaxshi ko'rinadigan hujayra siklining bosqichida. Har bir xromosoma replikatsiyalanadi va tegishli bo'yalgandan so'ng sentromeraga biriktirilgan ikkita xromatid yoki markaziy konstriksiya sifatida ko'rinadi. Keyin hujayralar gipotonik natriy xlorid eritmasi bilan ishlanadi, mahkamlanadi va bo'yaladi. Xromosomalarni bo'yash uchun ko'pincha Romanovskiy-Giemsa bo'yog'i, 2% atsetkarmin yoki 2% atsetarsein ishlatiladi. Ular xromosomalarni yaxlit, bir tekisda bo'yashadi (muntazam usul) va raqamli xromosoma anomaliyalarini aniqlash uchun ishlatilishi mumkin.

Inson xromosomalarining Denver tasnifi (1960). A guruhi (1-3) - uchta juft eng katta xromosomalar: ikkita metasentrik va 1 submetasentrik. B guruhi - (4 -5) - ikki juft uzun submetasentrik xromosomalar. C guruhi (6 -12) - 7 juft o'rta kattalikdagi submetasentrik autosomalar va X xromosoma. D guruhi (13-15) - uch juft o'rta akrosentrik xromosomalar. E guruhi (16-18) - uch juft metatsintrik va submetasentrik xromosomalar. F guruhi (19-20) - ikki juft kichik metasentrik xromosomalar. G guruhi (21-22 va Y) - ikki juft kichik akrosentrik xromosomalar va Y xromosomalari.

1. Muntazam (bir xil) bo'yash 2. Xromosomalar sonini tahlil qilish va strukturadagi buzilishlarni (aberratsiyalarni) aniqlash uchun ishlatiladi. Muntazam bo'yash bilan faqat xromosomalar guruhini ishonchli aniqlash mumkin, differentsial bo'yash bilan - barcha xromosomalar

Denver va Parij tasnifi bo'yicha odam xromosomalarining idiogrammasi A B C E D F G

Xromosomalarni differentsial bo'yash usullari Q-bo'yash - lyuminestsent mikroskop ostida tekshirish bilan Kaspersson bo'yicha akriliniprit bilan bo'yash. U ko'pincha Y xromosomalarini o'rganish uchun ishlatiladi. G-bo'yash - o'zgartirilgan Romanovskiy-Giemsa bo'yash. Sezuvchanlik Q-bo'yashdan yuqori, shuning uchun u sitogenetik tahlilning standart usuli sifatida ishlatiladi. U mayda aberratsiyalar va marker xromosomalarni (oddiy gomologik xromosomalardan farqli ravishda segmentlangan) aniqlash uchun ishlatiladi.R-bo'yash - akridin apelsin va shunga o'xshash bo'yoqlardan foydalaniladi, G-bo'yashga sezgir bo'lmagan xromosoma hududlari bo'yaladi. C-bo'yash konstitutsiyaviy heterokromatinni o'z ichiga olgan xromosomalarning sentromerik hududlarini tahlil qilish uchun ishlatiladi. T-bo'yash - xromosomalarning telomerik hududlarini tahlil qilish uchun ishlatiladi.

Xromosoma uzunligi bo'ylab kuchli va zaif kondensatsiya joylari har bir xromosoma uchun o'ziga xosdir va har xil rang intensivligiga ega.

Floresan in situ gibridizatsiyasi (FISH) spektral karyotiplash bo'lib, u xromosomalarning ma'lum hududlari bilan bog'langan floresan bo'yoqlar to'plami bilan xromosomalarni bo'yashdan iborat. Bunday bo'yash natijasida homolog juft xromosomalar bir xil spektral xususiyatlarga ega bo'ladi, bu esa bunday juftlarni aniqlashni va xromosomalararo translokatsiyalarni aniqlashni sezilarli darajada osonlashtiradi, ya'ni xromosomalar orasidagi hududlarning harakatini - ko'chirilgan hududlarning turli xil spektrlarga ega bo'lishi. xromosomaning qolgan qismining spektri.

Floresan in situ gibridizatsiyasi (FISH) Floressensiya in situ gibridizatsiyasi yoki FISH, metafaza xromosomalari yoki in situ interfaza yadrolaridagi ma'lum DNK ketma-ketligini aniqlash va o'rnini aniqlash uchun ishlatiladigan sitogenetik usuldir. In situ floresan gibridizatsiyasi namunadagi qo'shimcha nishonlarga bog'langan DNK problaridan (DNK problari) foydalanadi. DNK problarida ftoroforlar (to'g'ridan-to'g'ri belgilash) yoki biotin yoki digoksigenin (bilvosita etiketlash) kabi konjugatlar bilan belgilangan nukleozidlar mavjud.

Surunkali miyeloid leykemiyada t (9; 22) (q 34; q 11) translokatsiyasini FISH usuli bilan aniqlash ABL 1 geni (xromosoma 9) BCR geni (xromosoma 22) - kimerik BCR-ABL 1 geni bilan birlashtirilgan. Filadelfiya xromosomali metafaza plitasi hosil bo'ladi. Xromosomalar ko'k rangga ega, ABL 1 lokusu qizil va BCR lokusu yashil rangga ega. Yuqori chap - qizil-yashil nuqta bilan belgilangan qayta tashkil etilgan xromosoma.

Ko'p rangli FISH - spektral karyotiplash, xromosomalarning ma'lum hududlari bilan bog'langan floresan bo'yoqlar to'plami bilan xromosomalarni bo'yashdan iborat. Bunday bo'yash natijasida homolog juft xromosomalar bir xil spektral xususiyatlarga ega bo'ladi, bu esa bunday juftlarni aniqlashni va xromosomalararo translokatsiyalarni aniqlashni sezilarli darajada osonlashtiradi, ya'ni xromosomalar orasidagi hududlarning harakatini - ko'chirilgan hududlarning turli xil spektrlarga ega bo'lishi. xromosomaning qolgan qismining spektri.

Karyotip 46, XY, t (1; 3) (p 21; q 21), del (9) (q 22) 1 va 3-xromosomalar orasidagi translokatsiya, 9-xromosomaning delektsiyasi. Xromosoma bo'limlari ko'ndalang belgilar komplekslari (klassik karyotiplash, chiziqlar) va floresans spektri (rang, spektral karyotiplash) bilan belgilanadi.

Odamning irsiy patologiyasini o'rganishning ko'plab usullari orasida sitogenetik usul asosiylaridan biridir. Inson genetikasidagi sitogenetik tadqiqotlar yordamida salomatlik va kasallikdagi irsiyat va kariotipning moddiy asoslarini tahlil qilish, mutatsiya va evolyutsiya jarayonlarining ayrim qonuniyatlarini o'rganish kabi murakkab masalalarni hal qilish mumkin. Odamlardagi barcha xromosoma kasalliklari sitogenetik usul yordamida aniqlangan. Uni amalga oshirish uchun periferik qon limfotsitlari, teri fibroblastlari va suyak iligi madaniyati qo'llaniladi. Odam xromosomalarining tasnifi, individuallashtirish usullari

turli xil bo'yash turlarini qo'llagan xromosomalar, xromosomalarning molekulyar tashkil etilishi, odamning xromosoma jinsi - bularning barchasi ushbu monografiyadan keyin tez orada nashr etiladigan tibbiy genetika bo'yicha seminarda yoritiladi.

Tibbiy genetikada inson sitogenetikasi alohida o'rin tutadi. Buning sababi shundaki, odamlarda jinsiy differentsiatsiyaning ko'plab nuqsonlari va buzilishlarining aksariyati autosomal va gonosal tizimdagi turli xil tarkibiy va sonli kasalliklar bilan bog'liq. Yaqin vaqtgacha sitogenetik usuldan foydalanib, faqat karyotip - xromosomalarning aniq soni va tuzilishi haqida hukm chiqarish mumkin edi. Sog'liqni saqlash amaliyotiga molekulyar sitogenetikaning yuqori aniqlikdagi usullarini joriy etish bilan muntazam sitogenetik usullar yordamida tashxis qo'yish mumkin bo'lmagan patologiyaning "kalitlarini topish" mumkin edi. DNK diagnostikasi, nuklein kislotalarning gibridlanishi ishlab chiqilgan va klinik sitogenetikaga kiritilgan. joyida, ko'p sonli mikrodeletsiya sindromlarining tabiatini aniqlashga yordam bergan (Vorsanova S.G. va boshqalar, 1998, 1999, 2006); xromosomalarni tahlil qilish uchun kompyuter tizimlari paydo bo'ldi, ular xromosomalarni avtomatik tahlil qilish imkonini beradi va DNK zondlarini juda samarali ko'p rangli aniqlashni amalga oshiradi. Bu yo‘nalishdagi juda muvaffaqiyatli ishlarni ruhiy salomatlik ilmiy markazi (rahbari Yurov Yu.B.) va Moskva pediatriya va bolalar xirurgiyasi ilmiy-tadqiqot instituti (rahbari Vorsanova S.G.) laboratoriyalari olib bormoqda, ularda asl nusxa yaratildi. barcha inson xromosomalari va ularning alohida hududlari uchun DNK problarining xromosomaga xos to'plami.

Sitogenetik tadqiqotlarga bo'lgan ehtiyoj juda ko'p sonli xromosoma kasalliklari mavjudligi bilan bog'liq. Xromosoma anomaliyalarining 1000 ga yaqin turlari allaqachon tasvirlangan, ularning 100 dan ortig'i uchun klinik ko'rinish aniq belgilangan. Yangi tug'ilgan chaqaloqlarda xromosoma anomaliyalarining chastotasi taxminan 1% ni tashkil qiladi, o'lik tug'ilgan chaqaloqlarda bu ko'rsatkich 6-7% ni tashkil qiladi. Psikomotor rivojlanishining kechikishi va ichki organlarning nuqsonlari bilan tug'ilgan bolalarda xromosoma kasalliklari 1 dan 30% gacha. Bundan tashqari, homiladorlikning birinchi trimestridagi spontan abortlarning kamida 60% (homiladorlikning birinchi kunlarida bu ko'rsatkichlar undan ham yuqori) xromosoma aberatsiyasi bilan bog'liqligi hammaga ma'lum.

Xromosoma anomaliyalari embriogenezni jiddiy ravishda buzadi. Ushbu davrda morfogenez davrida barcha xromosomalarda lokalizatsiya qilingan 1000 tagacha genlar kelajakdagi nasllarning rivojlanishida ishtirok etadilar, shuning uchun xromosoma yoki genomik mutatsiya spontan abortga olib kelishi mumkin (Bochkov N.P., 2004). Urug'langan tuxumlarning taxminan 1/3 qismi homiladorlikning 1-haftasida nobud bo'ladi. Ikkinchi trimestrda xromosoma anomaliyalari 25-30% hollarda spontan abortlarning sababi hisoblanadi. Homiladorlikning 20-haftasidan keyin xromosoma anomaliyalari faqat 10% hollarda sodir bo'ladi. Takroriy o'z-o'zidan abortlar, o'lik tug'ilishlar yoki nuqsonli bolalar tug'ilishi bilan og'ir akusherlik tarixi bilan 5% da xromosoma anomaliyalari aniqlanadi.

Boshqa kontingentlar qatorida xromosoma anomaliyalari oligofreniya bilan og'rigan bolalarda uchraydi - o'rtacha 15% (asosan, tarkibiy o'zgarishlar tufayli). Jinsiy farqlanish buzilgan bemorlarda xromosoma anomaliyalarining chastotasi 20 dan 50% gacha (mozaiklik 50% hollarda topiladi). Birlamchi va ikkilamchi amenoreya bilan og'rigan bemorlarda xromosoma anomaliyalarining chastotasi 10 dan 50% gacha (90% dan ko'prog'i raqamli buzilishlar va mozaiklik). Erkak bepushtligida g'ayritabiiy xromosomalarning chastotasi 10-15% ga etadi (70% gacha - sonli buzilishlar va mozaiklik).

Tibbiy genetika, shu jumladan sitogenetika bo'yicha bilimlar akusher-ginekologlar, pediatrlar, endokrinologlar, neyropsikologlar, patologlar va boshqa mutaxassislar uchun zarurdir. Neyropsikiyatrik kasalliklar, jinsiy sohaning buzilishi yoki reproduktiv funktsiyaning xromosoma apparati buzilishi bilan bog'liq bo'lgan nafaqat bolalar, balki katta yoshli bemorlar ham etarli.

Tarixiy jihatdan, klinisyenler inson xromosomalarining aniq sonini aniqlashdan oldin xromosoma kasalliklarini o'rganishni boshladilar. Daun, Klaynfelter va Shereshevskiy-Tyorner sindromlari ushbu kasalliklarning xromosoma etiologiyasi kashf etilishidan ancha oldin klinik tasvirlangan.

Daun sindromida "qo'shimcha" xromosomaning ochilishi bilan (Lejeune J. va boshqalar, 1959) tibbiyotga yangi tushuncha - "xromosomapatiya" yoki "xromosoma kasalliklari" kirib keldi.

Hozirgi vaqtda xromosoma kasalliklari patologiyaning bunday shakllarini o'z ichiga oladi, ularda, qoida tariqasida, ruhiy kasalliklar va turli xil tug'ma tug'ma nuqsonlar mavjud.

inson tanasining tizimlari. Bunday holatlarning genetik asosi somatik yoki jinsiy hujayralarda kuzatiladigan xromosomalardagi son yoki strukturaviy o'zgarishlardir.

Xromosoma anomaliyalariga nisbatan "kasallik" atamasi har doim ham adolatli ishlatilmaydi. Kasallik - bu jarayon, ya'ni. simptomlar va sindromlarning o'z vaqtida muntazam o'zgarishi. Kasallik prodrom, boshlanishi, to'liq rivojlanish bosqichi va boshlang'ich holatiga ega. Har qanday xromosoma anomaliyasini tavsiflovchi o'ziga xos xususiyatlar to'plami konstitutsiyaviy, tug'ma bo'lib, bu belgilar progressiv emas. Boshqacha qilib aytganda, karyotipning buzilishiga asoslangan konjenital rivojlanish anomaliyalari odatdagi ma'noda kasalliklardan protsessual bosqichning vaqtning keskin o'zgarishi bilan ajralib turadi. Bu holda protsessual bosqich embrion rivojlanish davrida sodir bo'ladi. Shu sabablarga ko'ra, "xromosoma kasalliklari" atamasidan foydalanish uning o'ziga xosligini to'liq anglagan holda qo'llanilishi kerak.

Tibbiy genetikaning va birinchi navbatda klinik odam sitogenetikasining eng muhim vazifalaridan biri xromosoma anomaliyalari va rivojlanish nuqsonlari o'rtasidagi bog'liqlikni aniqlashdir. Bu muammoni ijobiy hal etish, o'z navbatida, har bir alohida xromosomaning inson embrion rivojlanishidagi rolini aniqlashga imkon beradi; Bu, albatta, sitogenetiklarga har bir alohida xromosoma joylashuvining sitologik xaritalarini tuzishga yordam beradi va shu bilan uning butun organizmning rivojlanishi va hayotiy faoliyati uchun ahamiyatini aniqlaydi.

3.2. XROMOSOMAL KASALLIKLAR ETIOLOGIYASI VA TASNIFI

Xromosoma anomaliyalari orasida genomik va xromosoma anomaliyalarini ajratish odatiy holdir. Odamlarda xromosoma va genomik mutatsiyalarning barcha shakllari topilgan. Genomik mutatsiyalar xromosomalarning to'liq to'plamining ko'payishi (poliploidiya) yoki juftliklardan birida xromosomalar sonining o'zgarishi (anevloidiya) bilan tavsiflangan anomaliyalarni o'z ichiga oladi. Strukturaviy xromosoma mutatsiyalari odamlarda uchraydigan barcha turdagi o'zgarishlarni o'z ichiga oladi - o'chirish (etishmasligi), dublikatsiya (ikki marta ko'payish), inversiya (aylantirish), qo'shish (qo'shish), translokatsiya (o'zgartirish).

Qayta tashkil etishning ikkita asosiy turini ajratish mumkin: intraxromosoma va interxromosoma. O'z navbatida, qayta tashkil etish muvozanatli bo'lishi mumkin (ya'ni, barcha lokuslar genomda mavjud, ammo ularning xromosomalardagi joylashuvi dastlabki holatdan farq qiladi - normal) va muvozanatsiz. Balanssiz qayta tashkil etish xromosoma mintaqalarining yo'qolishi yoki ko'payishi bilan tavsiflanadi. Bitta xromosoma qo'lidagi o'zgarishlar bilan bog'liq bo'lgan intraxromosomalarning qayta tuzilishi parasentrik deyiladi. Tsentromera bo'lmagan eng tashqi hududlar fragmentlar deb ataladi va ular odatda mitoz jarayonida yo'qoladi.

Deletsiya - ikkita tanaffus va bir marta qo'shilish natijasida xromosoma qismining yo'qolishi, tanaffuslar orasida joylashgan segmentning yo'qolishi. Odamlarda 5-xromosoma qisqa qo'lining 1/3 qismini yo'qotishi ma'lum bo'lib, "mushuk yig'lash" sindromi deb ataladi va birinchi marta 1963 yilda J. Lejeune tomonidan tasvirlangan.

Duplikatsiya - xromosoma segmentining duplikatsiyasi, buning natijasida tana hujayrasi ushbu segmentda poliploid bo'ladi. Agar duplikatsiya to'g'ridan-to'g'ri xromosomaning asl mintaqasi orqasida bo'lsa, u tandem duplikatsiyasi deb ataladi. Bundan tashqari, dublikatsiyalar xromosomaning boshqa hududlarida joylashgan bo'lishi mumkin. Ushbu qayta qurishlarning aksariyati o'limga olib keladi va ular bilan birga omon qolgan odamlar, qoida tariqasida, naslni ko'paytirishga qodir emaslar.

Inversiya holatida xromosoma qismi 180 ° ga buriladi va singan uchlari yangi tartibda ulanadi. Agar sentromera teskari sohaga tushsa, bunday inversiya perisentrik deyiladi. Agar inversiya xromosomaning faqat bitta qo'liga ta'sir qilsa, u parasentrik deyiladi. Xromosomaning teskari mintaqasidagi genlar xromosomadagi asl nusxaga nisbatan teskari tartibda joylashgan.

Xromosomalararo tuzilishga translokatsiyalar kiradi - xromosomalar orasidagi segmentlar almashinuvi. Translokatsiyaning quyidagi turlari mavjud:

Ikki xromosoma o'zaro segmentlarni almashtirganda (muvozanatli translokatsiya) o'zaro translokatsiya; inversiya kabi, u egasiga anomal ta'sir ko'rsatmaydi;

O'zaro bo'lmagan translokatsiya - bir xromosoma segmenti boshqasiga o'tkazilganda;

Tsentrik ulanish turining translokatsiyasi - sentromeraga yaqin mintaqadagi uzilishlardan so'ng, sentromerali ikkita bo'lak ularning sentromeralari qo'shilib, bitta hosil qiladigan tarzda bog'langanda. D va G guruhlaridagi ikkita akrosentrik xromosomalarning o'zaro birlashishi bitta metasentrik yoki submetasentrik xromosomaning shakllanishiga olib keladi. Ushbu translokatsiya Robertsonian deb ataladi.

Guruch. 3.3. Translokatsiya t (5; 14)

Translokatsiya Daun sindromi shu tarzda sodir bo'ladi, bemorlarda Daun kasalligining aniq belgilari bor, ammo ularning karyotipi atigi 46 xromosomaga ega va 21 xromosoma ikkita, uchinchisi odatda D yoki G guruhidagi xromosomalardan biriga ko'chiriladi. bunday bolalarning ota-onalari karyotiplari shuni ko'rsatdiki, ko'pincha fenotipik jihatdan normal ota-onalar (odatda onalar) 45 xromosomaga ega va 21-xromosomaning xuddi bola kabi translokatsiyasi.

Xromosoma kasalliklarining tasnifi xromosoma anomaliyasining turiga va tegishli karyotipning xromosoma moddasining nomutanosibligi xarakteriga asoslanadi. Ushbu tamoyillarga asoslanib, xromosoma anomaliyalari uch guruhga bo'linadi:

Alohida xromosomalar uchun raqamli anomaliyalar;

Xromosomalarning to'liq haploid to'plamining ko'pligini buzish;

Xromosomalarning strukturaviy qayta tuzilishi.

Birinchi ikki guruh genomik mutatsiyalarni, uchinchi guruh esa xromosoma mutatsiyalarini bildiradi. Bundan tashqari, mutatsiya sodir bo'lgan hujayralar turini (gametalarda yoki zigotalarda) hisobga olish kerak, shuningdek, mutatsiya meros bo'lib qolganmi yoki u yangidan paydo bo'lganligini yodda tutish kerak. Shunday qilib, xromosoma kasalligi tashxisini qo'yishda quyidagilarni hisobga olish kerak:

Mutatsiya turi;

Muayyan xromosoma;

Shakl (to'liq yoki mozaik);

Meroslangan yoki meros bo'lmagan holat.

Inson xromosomalari to'plamida yuzaga keladigan xromosoma anomaliyalarining aksariyati xromosomalar sonining buzilishi bilan bog'liq. Poliploidiya normal mitotik siklning buzilishi natijasida yuzaga keladi: xromosomalarning ko'payishi yadro va hujayralarning bo'linishi bilan birga kelmaydi. Odamlarda tavsiflangan poliploidiyaga misollar triploidiya (69, XXX; 69, XXY) va tetraploidiya (92, XXXX; 92, XXXY). Bu buzilishlar hayot bilan mos kelmaydi va spontan abortlar yoki homila va o'lik tug'ilgan chaqaloqlarda, ba'zan esa bunday anomaliyalar bilan umr ko'rish muddati, qoida tariqasida, bir necha kunni tashkil etadigan yangi tug'ilgan chaqaloqlarda uchraydi.

Aneuploidiya xromosomalarning meyotik bo'linishlarda yoki mitozda bo'linmasligi natijasida yuzaga keladi. "Nizjunction" atamasi anafazada xromosomalarning (meyozda) yoki xromatidlarning (mitozda) ajralmasligini anglatadi. Divergentsiya natijasida g'ayritabiiy xromosomalar to'plamiga ega gametalar paydo bo'ladi.

Odamlarda xromosomalardagi strukturaviy o'zgarishlar soni aberratsiyalarga qaraganda ancha kam uchraydi. Strukturaviy o'zgarishlar genetik material miqdorining o'zgarishi (yo'q qilish va ko'paytirish) bilan birga xromosoma va xromatid bo'lishi mumkin yoki faqat uning harakatiga (inversiya, kiritish, translokatsiya) kamayishi mumkin. Qayta tartibga solish bir yoki bir nechta xromosomalarni bir nechta tanaffus va birikmalarga ega bo'lishi mumkin. Ba'zida tanada turli xil karyotipli hujayralar topilishi mumkin. Karyotipning bu birikmasi odatda "mozaiklik" atamasi bilan belgilanadi.

Ko'pgina xromosoma kasalliklari sporadik ravishda sog'lom ota-onalarning gametalarida yoki zigotaning birinchi bo'linmalarida genomik va xromosoma mutatsiyalari natijasida yuzaga keladi. Gametalardagi xromosoma o'zgarishlari karyotip buzilishining to'liq yoki muntazam deb ataladigan shakllarining rivojlanishiga olib keladi va embrion rivojlanishning dastlabki bosqichlarida xromosomalardagi mos keladigan o'zgarishlar somatik mozaik yoki mozaik organizmlarning (tanadagi mavjudligi) sababidir. Xromosomalarning soni har xil bo'lgan ikki yoki undan ortiq hujayra chizig'idan iborat). Mozaiklik jinsiy xromosomalarga ham, autosomalarga ham ta'sir qilishi mumkin. Odamlarda mozaik shakllar ko'pincha jinsiy xromosomalar tizimida uchraydi. Mozaikalar, qoida tariqasida, har bir hujayradagi xromosomalar soni o'zgargan odamlarga qaraganda kasallikning "o'chirilgan" shakllariga ega. Shunday qilib, Daun kasalligining mozaik versiyasi bo'lgan bola, aslida, oddiy aqlga ega bo'lishi mumkin, ammo bu kasallikning jismoniy belgilari hali ham saqlanib qoladi.

Anormal hujayralar soni har xil bo'lishi mumkin: qancha ko'p bo'lsa, ma'lum bir xromosoma kasalligining simptomlar majmuasi shunchalik aniq bo'ladi. Ba'zi hollarda g'ayritabiiy hujayralar ulushi shunchalik past bo'ladiki, odam fenotipik jihatdan sog'lom ko'rinadi.

Mozaitizmni o'rnatish unchalik oson emas, chunki g'ayritabiiy hujayralar kloni ontogenezda yo'q qilinadi. Boshqacha qilib aytganda, kattalarda bunday hujayralar soni nisbatan kichik bo'lishi mumkin, embrion va tug'ruqdan keyingi erta davrlarda ularning solishtirma og'irligi ancha katta bo'lib, bu kasallikning aniq klinik belgilarining rivojlanishiga olib keldi. Biroq, mozaizmni o'rganishdagi ma'lum qiyinchiliklarga qaramay, uning kashfiyoti va tadqiqotlari xromosoma kasalliklarining o'chirilgan va rudimentar shakllari muammosini aniqlab beradi.

Insonning har qanday karyotip xromosomalari soni yoki strukturaviy o'zgarishlarda ishtirok etishi mumkin. Bunga asoslanib, tavsiflangan xromosoma shakllarining juda keng turlarini kuzatish mumkin. Amaliy sitogenetik doimo inson rivojlanishining turli davrlarida turli hujayralar va to'qimalarni o'rganishda xromosoma anomaliyalarini aniqlash bilan duch keladi. Xromosoma anomaliyalarida ishtirok etishi mumkin bo'lgan individual xromosomalarni tasniflash va shuning uchun xromosoma sindromlarini izolyatsiya qilish xromosoma tahliliga xromosomalarni individuallashtirish usullarini joriy etish tufayli hozirgi vaqtda oson hal qilinadigan muammodir: uzunlik bo'ylab turli xil bo'yash; nuklein kislotalarning gibridlanishi

kislotalarni chiqaradi joyida, qiyosiy genomik duragaylash usuli, xromosoma tahlilining spektroskopik usuli. So'nggi paytlarda FISH tahlilida ba'zan ko'p rangli DNK zondlaridan foydalaniladi, bu esa xromosomalarning sifatli va miqdoriy qayta tuzilishini tezda aniqlash imkonini beradi.

3.3. XROMOSOMAL KASALLIKLARNING PATOGENEZI VA KLINIK XUSUSIYATLARI.

Xromosoma anomaliyalari genetik ma'lumotlarning miqdori yoki sifatining uning ko'pligi yoki etishmasligi yo'nalishi bo'yicha o'zgarishi natijasida yuzaga keladi, ontogenezning normal genetik dasturi (organizmning individual rivojlanishi) faoliyatini buzadi. Xromosoma kasalliklarining namoyon bo'lishining tabiati va zo'ravonligi anormallik turiga va xromosomalarga bog'liq. Xromosoma sindromlari odatda xromosoma aberatsiyasining turidan qat'i nazar, bir nechta malformatsiyalar bilan tavsiflanadi. Har xil turdagi xromosomalarning shikastlanishi va ular tomonidan yuzaga keladigan rivojlanish og'ishlari bo'yicha ko'plab tadqiqotlar xromosoma kasalliklari patogenezida jismoniy (somatik) va aqliy rivojlanishning buzilishi asosiy o'rinni egallaydi, degan xulosaga kelishga imkon beradi.

Xromosoma anomaliyalarining barcha shakllari uchun umumiy xususiyat - turli tizimlar va organlarning ko'p qirrali shikastlanishi. Rivojlanishning buzilishi keng diapazonda kuzatilishi mumkin - parchalanishning birinchi bosqichlarida zigotalarning o'limi va yo'q qilinishidan postnatal mavjudlik bilan mos keladigan buzilishlargacha. Xromosoma anomaliyalarini to'liq klinik va sitogenetik o'rganish har xil kombinatsiyalarda va har xil zo'ravonlik darajasida barcha zararlangan shaxslarda topilgan bir qator belgilarni aniqlashga imkon beradi. Bu belgilarga aqliy zaiflik, tug'ruqdan oldingi va tug'ruqdan keyingi rivojlanish kechikishi, ko'plab organ tizimlarining anomaliyalari, ayniqsa, maxillofasiyal mintaqa, skelet, yurak-qon tomir va genitouriya tizimlari kiradi. Xususan, kraniofasial displaziya, quloqchalarning shakli va joylashuvining anormalligi, gipertelorizm, epikantus, gotik tanglay, ko'z tirqishlari va olma tuzilishidagi anomaliyalar, kaft va oyoq tagidagi teri naqshining o'ziga xos o'zgarishi, strukturaning anomaliyasi va boshqalar. pastki va yuqori ekstremitalarning barmoqlarining joylashishi va boshqalar qayd etiladi.

Xromosoma kasalliklarida topilgan barcha diagnostik belgilar shartli ravishda uch guruhga bo'linishi mumkin.

Birinchi guruh faqat xromosoma anomaliyasiga shubha qilish imkonini beruvchi belgilar to'plamini o'z ichiga oladi. Bular umumiy belgilar (ularning ba'zilari yuqorida sanab o'tilgan): jismoniy rivojlanishning pastligi, miya va yuz bosh suyagining bir qator dismorfizmlari, oyoq oyoqlari, kichik barmoqlarning klinodaktiliyasi, ichki organlarning (yurak, buyraklar, o'pkalar) ayrim nuqsonlari.

Ikkinchi guruhga asosan ma'lum xromosoma kasalliklarida uchraydigan belgilar kiradi. Ularning kombinatsiyasi ko'p hollarda xromosoma anomaliyasini tashxislash imkonini beradi. 13-xromosomaning 13-trisomiyasidagi xarakterli, eng ko'p uchraydigan belgilar orasida aqliy va jismoniy rivojlanishning chuqur kechikishi (100%), gipertelorizm (90%), pastda joylashgan xunuk quloqlar (90%) deb atash kerak. 18-xromosoma trisomiyasi bilan dolikosefaliya (90%), psixomotor va jismoniy rivojlanishning jiddiy kechikishi (100%), yutish qiyinligi, ovqatlanish muammolari (100%), mikrognatiya va kalta sternum (90%) qayd etilishi kerak.

Uchinchi guruhga faqat bitta xromosoma anomaliyasiga xos bo'lgan belgilar kiradi, masalan, 5p sindromida "mushukning yig'lashi", 18p sindromida alopesiya.

Fenotipning karyotip bilan o'zaro bog'liqligini o'rganishda muhim xulosaga keldikki, xromosoma moddasi qancha ko'p yo'qolsa yoki olingan bo'lsa, rivojlanishdagi og'ishlar qanchalik kuchli bo'lsa, ular ontogenezda shunchalik erta paydo bo'ladi. Shuning uchun katta xromosomalardagi anomaliyalar juda kam uchraydi. Bundan tashqari, genetik materialning etishmasligi tanaga uning ortiqcha qismidan ko'ra ko'proq ta'sir qiladi va shuning uchun to'liq monosomiyalar (ayniqsa, tirik tug'ilgan bolalarda) to'liq trisomiyalarga qaraganda ancha kam uchraydi. Klinik ko'rinishning og'irligi nafaqat patologik jarayonda ishtirok etadigan xromosoma hajmiga bog'liq, balki uning sifat tarkibi ham katta ahamiyatga ega. Misol uchun, tirik tug'ilgan chaqaloqlarda to'liq trisomiyalar ko'pincha 13, 18, 21 autosomalarda uchraydi. Bu, bu xromosomalarda evromatinga qaraganda ko'proq geteroxromatinni o'z ichiga olganligi bilan bog'liq. Ikkinchisi organizm belgilarining rivojlanishini nazorat qiluvchi genlarni o'z ichiga olgan faol hududlarga asoslangan. Va, tabiiyki, bunday oqsillarni ishlab chiqarishni belgilaydigan genlar etishmovchiligi mavjud bo'lgan hujayra

hujayra hayotiyligini ta'minlaydigan asosiy biokimyoviy reaktsiyalarda ishtirok etish.

Xromosoma anomaliyalari xomilalik o'lim chastotasining ortishi va tirik tug'ilganlarning hayotiyligining pasayishi bilan tavsiflanadi. Biroq, ba'zi xromosoma anomaliyalari bilan, balog'at yoshiga qadar omon qolish mumkin. Avvalo, bu jinsiy xromosoma tizimidagi patologiya bilan bog'liq bo'lgan sindromlar guruhini nazarda tutadi. Jinsiy xromosomalar tizimidagi anomaliyalar natijasida kelib chiqqan umumiy gen nomutanosibligi organizmning rivojlanishi uchun avtosomal aberatsiyalarga qaraganda kamroq halokatli, shuning uchun inson karyotipida gonosomal anomaliyalarning mavjudligi nafaqat tug'ilish, balki normal holatga ham mos keladi. yashovchanlik va hatto ba'zan normal fenotip bilan.

Yangi tug'ilgan chaqaloqlar va sog'lom kattalarning katta populyatsiyalarida, shuningdek aqli zaif odamlarning turli kontingentlarida o'tkazilgan ko'plab tadqiqotlar aqliy zaif odamlarda jinsiy xromosoma anomaliyalari yangi tug'ilgan chaqaloqlarga qaraganda 4-5 marta tez-tez sodir bo'lishini aniqlashga imkon berdi.

Klaynfelter sindromi bo'lgan erkaklarning 17-25 foizida aql-idrok pasayganligi aniqlandi. Ayollarda qo'shimcha X xromosomasi erkaklarnikiga qaraganda aqlning yanada ko'proq pasayishiga olib keladi.

Qo'shimcha X xromosomalari soni va aqliy zaiflik darajasi o'rtasida to'g'ridan-to'g'ri bog'liqlik mavjud edi. Agar bitta qo'shimcha X xromosomaning mavjudligi har doim ham oligofreniya (XXY, XXX sindromlari) bilan birga bo'lmasa, ikkita qo'shimcha X xromosomaning mavjudligi har doim aqliy zaiflik rasmini beradi (karyotipi 48, XXXY bo'lgan bemorlarda o'rtacha IQ qiymatlari). 52,5 va karyotipi 49, XXXXY bilan - 35,2). Shereshevskiy-Tyorner sindromi aqliy zaif ayollarda kam uchraydi.

Avto- va gonosomal aberratsiyalarda aqliy zaiflikning sabablari, shubhasiz, gen muvozanatining qo'pol buzilishi va natijada ko'plab ferment funktsiyalarining buzilishidir.

Yuqorida aytib o'tilganidek, xromosoma kasalliklarining bir xil shakllarining klinik ko'rinishi juda katta farq qiladi: o'ldiradigan ta'sirdan kichik og'ishlarga qadar. Nima uchun bu sodir bo'lishi noma'lumligicha qolmoqda: genotipik omillar yoki atrof-muhit omillari etakchi rol o'ynaydi. Masalan, savolga javob yo'q,

nima uchun 21-xromosomada trisomiya holatlarining atigi 2/3 qismi prenatal davrda yo'q qilinadi (XO monosomiyasi bilan taxminan bir xil rasm kuzatiladi).

Xromosoma anomaliyalarining klinik (fenotipik) ko'rinishlarini shakllantirishda ko'plab omillar ishtirok etadi. Ular orasida, birinchi navbatda, ta'kidlash kerak:

Organizmning genotipi;

Xromosoma aberatsiyasida ishtirok etuvchi individual xromosomaning gen tarkibi;

Aberatsiya turi va etishmayotgan yoki ortiqcha xromosoma moddasining o'lchami;

Aberrant hujayralar uchun organizmning mozaiklik darajasi.

Klinik ko'rinishlarning zo'ravonligi normal va anormal hujayra klonlarining nisbatiga bog'liq;

Atrof-muhit omillari;

Organizm rivojlanishining ontogenetik bosqichi.

Taqdim etilgan ma'lumotlarga asoslanib, xromosoma anomaliyalarining patogenezida hali ham ko'p noaniqliklar mavjud degan xulosaga kelish kerak, chunki xromosoma kasalliklari bo'lgan murakkab patologik jarayonlarning rivojlanishining umumiy aniq sxemasi hali ham mavjud emas.

3.4. XROMOSOMAL KASALLIKLARNING CHASTOSLIGI VA TARQALIGI

Xromosoma kasalliklarining chastotasi va tarqalishi haqida eng to'liq ma'lumotni spontan abortlar, o'lik tug'ilgan chaqaloqlar va yangi tug'ilgan chaqaloqlarning sitogenetik tadqiqotlari asosida olish mumkin. Xromosoma anomaliyalarini hisobga olish usullari qat'iy birlashtirilgan bo'lishi kerak. Tug'ma nuqsonlari bo'lgan yangi tug'ilgan chaqaloqlar, erta tug'ilgan chaqaloqlar uchun sitogenetik tekshiruv zarur; oligofreniya bilan og'rigan, jinsiy farqlanish buzilgan, birlamchi va ikkilamchi amenoreya bilan og'rigan bemorlar, spontan abortlar, erkaklarning bepushtligi bo'lgan shaxslar. Sitogenetik usul amaliy va nazariy tibbiyotning ko'plab sohalarida (akusherlik va ginekologiya, pediatriya, psixiatriya, endokrinologlar, patologik anatomiya va boshqalar) qo'llanilishi mumkin - shuning uchun xromosoma patologiyasi, uning klinik xususiyatlari, diagnostika va profilaktika usullari haqidagi bilimlar muhim rol o'ynaydi. bo'lajak shifokorni tayyorlashda muhim rol ...

Yuqorida aytib o'tilganidek, xromosoma anomaliyalari ko'pincha spontan abortlarda kuzatiladi - 60% gacha, o'lik tug'ilgan chaqaloqlarda - 70% gacha va tirik tug'ilganlarda - taxminan 1%.

Xromosoma anomaliyalari bo'lgan yangi tug'ilgan chaqaloqlarda o'tkazilgan klinik va sitogenetik tadqiqotlar shuni ko'rsatadiki, hayotiylik xromosoma anomaliyasining turiga bog'liq. Otosomal trisomiyali yangi tug'ilgan chaqaloqlarning ko'pchiligi hayotning birinchi kunlarida vafot etadi. O'z navbatida, jinsiy xromosoma anomaliyalari bo'lgan bemorlarda hayotiylik biroz kamayadi. Bu ushbu kontingentdagi to'liq klinik ko'rinish faqat balog'at yoshida, tananing jinsiy rivojlanishini va ikkilamchi jinsiy xususiyatlarning shakllanishini belgilovchi genlar ishlay boshlaganida namoyon bo'lishiga bog'liq.

Ontogenezdagi xromosoma anomaliyalarining ta'siri orasida spontan abortlar va tug'ma nuqsonlar bilan bir qatorda, odamlarda bir hil disomiya fenomeni kuzatiladi. Uniparental disomiya kelajakdagi nasl ota-onalarning biridan juftliklardan birining ikkala xromosomasini olganida yuzaga keladi (karyotip 46 xromosoma bilan ifodalanadi). Natijada, ushbu kasallikning sababi bo'lishi mumkin bo'lgan patologik retsessiv genlar uchun homozigotizatsiya sodir bo'lishi mumkin. Gomogen disomiyaga misollar Prader-Villi, Angelman, Beckwith-Wiedemann sindromlari va boshqalar.

Xromosoma anomaliyalari nafaqat ontogenezning dastlabki davrlarida sodir bo'ladi. Hayot davomida odamlarda xromosomalarning o'z-o'zidan o'zgarishi kuzatiladi (taxminan 2%). Ko'pincha, bu qayta tashkil etish odatda yo'q qilinadi, lekin bir nuqtada ular malign o'sish manbai bo'lishi mumkin. Ma'lumki, ba'zi sonli va strukturaviy xromosoma anomaliyalari hujayralarning malign transformatsiyasiga olib keladi yoki onkologik kasalliklarning rivojlanishiga moyil bo'ladi. O'smaning rivojlanishi ko'pincha hujayraning dastlabki shtammidan tubdan farq qiladigan har xil turdagi xromosoma o'zgarishlarini tashuvchi yangi hujayra klonlarining paydo bo'lishi natijasida yuzaga keladi. "Saratondagi xromosoma aberratsiyalari katalogi" ning beshinchi nashrida umumlashtirilgan va e'lon qilingan juda ko'p sonli o'smalarni (25 mingdan ortiq) tahlil qilish natijasida yangi genlarni aniqlash mumkin bo'ldi. ba'zi hollarda malign degeneratsiyaga olib kelishi mumkin.

normal hujayralar. JSST ma'lumotlariga ko'ra, saraton tananing har qanday qismiga ta'sir qilishi mumkin bo'lgan 100 dan ortiq kasalliklarning umumiy atamasi bo'lib, genom kasalligi hisoblanadi. Retinoblastoma 13-xromosomaning uzun qo'lida prezigot xromosoma mutatsiyasi bilan o'ziga xos assotsiatsiyaga uchragan birinchi o'simta edi. Surunkali miyeloid leykemiya boshlanishini belgilovchi xromosoma mutatsiyasining klassik misoli Filadelfiya xromosomasi deb ataladi. 9 va 22-xromosomalarning uzun qo'llarining bo'limlarini ko'chirish oq qondagi malign o'zgarishlarni keltirib chiqaradigan g'ayritabiiy xromosoma hosil bo'lishiga olib keladi. Xromosomalarning boshqa translokatsiyalari (8; 21), (8; 14) ham ma'lum bo'lib, ular mos ravishda o'tkir miyeloid leykemiya va Burkitt limfomasi paydo bo'lishiga olib keladi.

O'tgan asrning 60-yillari o'rtalarida ko'plab tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, saraton tug'ma xromosoma anomaliyalari bo'lgan bemorlarda populyatsiyaga qaraganda bir necha baravar tez-tez uchraydi va ba'zi irsiy sindromlarda neoplazmalarga moyillik ko'payadi (yoki tufayli). spontan yoki induktsiya qilingan xromosoma shikastlanishining chastotasi.

Shuni esda tutish kerakki, tananing qarishi bilan xromosoma anomaliyalarining spontan darajasi oshadi.

"Xromosoma kasalliklari" atamasi ostidagi patologik sindromlar heterojendir. Odamlarda xromosoma anomaliyalarining ko'p sonli shakllari tasvirlangan. Biroq, ularning hammasi ham aniq belgilangan sindrom yoki kasallik shaklida "mustaqil" deb da'vo qila olmaydi. Buning sababi shundaki, ba'zi xromosoma anomaliyalarida patologik holat to'g'ridan-to'g'ri o'ziga xos xromosomalarning qayta tuzilishi tufayli yuzaga kelmaydi.

1 yoshgacha bo'lgan bolalarda morfologik nuqsonlarning umumiy chastotasi 1000 aholiga taxminan 27,2 ni tashkil qiladi. Ularning 60% ga yaqini hayotning dastlabki 7 kunida allaqachon akusherlik muassasalarida aniqlanadi. Malformatsiyalarning o'ziga xos sabablaridan biri bu "katta beshlik" deformatsiyasiga kiritilgan orofasiyal yoriqlar bo'lib, chastotada ikkinchi o'rinda turadi.

AQSh Milliy stomatologiya instituti ma'lumotlariga ko'ra, dunyo aholisining 40 foizi kraniofasiyal mintaqaning rivojlanishida tug'ma va irsiy anomaliyalarga ega, ularning 15 foizi jiddiy kasalliklarga muhtoj.

jarrohlik davolash yo'q. JSST ma'lumotlariga ko'ra, dunyoda tug'ma lab va tanglay yorig'i bilan kasallanish 1000 tug'ilishga 0,8 dan 2 tagacha o'zgarib turadi. Qit'alar bo'yicha taqsimlanishi quyidagicha: Osiyoda - 500 yangi tug'ilgan chaqaloqqa 1 ta holat; Evropada - 700 tadan 1; Afrikada - 1000 tadan 1; Rossiyada - 800 dan 1. Turli manbalarga ko'ra, Rossiyada kraniofasiyal mintaqaning tug'ma va irsiy anomaliyalari bo'lgan bemorlarning ulushi taxminan 35% ni tashkil qiladi va har yili 50 mingdan ortiq bola tug'iladi, bu esa stomatologiya xizmatining diqqatini talab qiladi. .

Maksillofasiyal hududning barcha anomaliyalari orasida eng ko'p uchraydigan tug'ma nuqsonlardan biri bu lab va tanglay yorig'i bo'lib, ularning aholi soni, turli manbalarga ko'ra, 1: 1000 dan 1: 460 gacha (har yili Moskvada bu ko'rsatkich 1 ga yaqin) : 700). Dudoqlar va/yoki tanglay yoriqlari yuzning barcha tug'ma nuqsonlarining 87% ni tashkil qiladi. Deyarli beshta tipik yoriqlardan biri og'ir sindromning tarkibiy qismidir.

Odamlarda uchraydigan 3 ta trisomiyadan (Daun sindromi, Patau sindromi va Edvards sindromi) lab va/yoki tanglayning yoriqlari Patau sindromida (taxminan 70%) uchraydi va bu sindromning eng tipik alomati hisoblanadi.

Tibbiy genetik maslahatlardan foydalanish tahlili shuni ko'rsatadiki, xromosoma kasalliklari, tug'ma nuqsonlari va nevropsikiyatrik kasalliklari bo'lgan oilalar ko'pincha ushbu ixtisoslashtirilgan tibbiy yordam turiga murojaat qilishadi. Sitogenetik usul va molekulyar sitogenetik usullar karyotipning barcha buzilishlarini bevosita aniqlash imkonini beradi. Ular xromosoma anomaliyalari oiladagi patologiyaning eng ehtimoliy etiologik omili sifatida qabul qilingan hollarda qo'llaniladi.

Raqamli xromosoma aberatsiyasidan kelib chiqqan kasalliklar uchun, agar ota-onaning hech birida xromosoma anomaliyasi yo'qligi ma'lum bo'lsa va boshqa xavf omillari (masalan, xromosoma anomaliyalari) bo'lmasa, oilada takrorlanish ehtimoli juda past (1% dan kam). onaning o'rtacha yoshi). Istisno - bu translokatsiyalar.

Trisomal Daun sindromi bo'lgan bolasi bo'lgan oilalar uchun boshqa kasal bola tug'ilish xavfi ortadi (Daun sindromi uchun 50-200 yangi tug'ilgan chaqaloqdan 1 tasi va barcha xromosoma anomaliyalari uchun 100 yangi tug'ilgan chaqaloqdan 1 tasi).

Jinsiy xromosoma anomaliyalari bilan oilada ulardan birortasining takrorlanishi juda kam uchraydi. XXY va XXX sindromlarida onaning yoshi bilan bog'liqlik aniqlandi. Bunday hollarda, aka-uka uchun xavf onaning yoshini hisobga olgan holda empirik (anomaliyaning har bir turi uchun) baholanadi. Agar ota-onalardan birining gametalarida muvozanatli xromosoma mutatsiyasi mavjud bo'lsa, translokatsiyalar uchun prognoz eng noqulay bo'ladi.

Sitogenetik tekshiruvga ko'rsatmalar:

Ayol 35 yoshdan oshgan;

Oldingi bolada xromosoma anomaliyalarining mavjudligi;

Ikki yoki undan ortiq tizimning tug'ma nuqsonlari;

Oligofreniya bilan birgalikda tug'ma nuqsonlar;

Noma'lum etiologiyaning oligofreniyasi;

Oilaning xromosomalarini qayta tashkil etish;

Spontan abort va takroriy abort;

Ultratovush yordamida aniqlangan xomilalik patologiya. Anormal karyotiplarni autosomalar tomonidan qayd etish qoidalari:

Amaliyotida xromosoma anomaliyalariga duch kelgan har qanday shifokor normal va aberrant karyotiplarni qayd etish qoidalarini bilishi kerak. Quyidagilarni yodda tutish kerak.

1. Eng boshida xromosomalarning umumiy soni ko'rsatiladi.

3. Qo'shimcha autosoma mos keladigan raqam va "+" belgisi bilan ko'rsatiladi, u xromosoma oldiga qo'yiladi, masalan: 47, XY, +21 (Daun sindromli erkak karyotipi). Butun xromosomaning yo'qolishi "-" belgisi bilan ko'rsatiladi, masalan: 45, XX, -13 (xromosoma 13 monosomiyasi bo'lgan ayol karyotipi).

4. Xromosomaning qisqa qo'li, yuqorida aytib o'tilganidek, lotincha "p" harfi bilan, uzun qo'l - "q" bilan belgilanadi. Masalan, 46, XY, 5 p- ("mushuk qichqiriq" sindromi).

5. Translokatsiya qavs ichidagi dekodlash bilan "t" harfi bilan belgilanadi, masalan, 45, XX, t (14/21) - muvozanatli translokatsiyaning ayol tashuvchisi 14/21.

6. Bir nechta hujayra chizig'ining mavjudligi (mozaiklik) kasr belgisi bilan ko'rsatiladi, masalan: 45, X / 46, XX - Shereshevskiy-Tyorner sindromi mozaikalari.

Ushbu belgilar va atamalar faqat inson xromosomalarini muntazam bo'yash uchun ishlatiladi. Inson sitogenetikasiga xromosomalarni bo'yashning yangi usullarini, xususan, differentsial bo'yashni ishlab chiqish va joriy etish bilan metafaza xromosomalarining individual o'ziga xos chizig'ini takrorlaydigan bir nechta texnik protseduralar paydo bo'ldi. Xromosoma qorong'u va engil chiziqlar (band)larda bo'ya boshladi. Xromosoma preparatlarini qayta ishlashning turli usullari bilan bir xil bantlar ochiq yoki qorong'i bo'lishi mumkin.

Tadqiqot maqsadiga qarab, klinik sitogenetikada differentsial bo'yashning ikkita asosiy turi qo'llaniladi. Birinchi turdagi xromosomani butun uzunligi bo'ylab bo'yash usullari qo'llaniladi (G-, Q-, R-bandlari usullari). Ikkinchi holda, o'ziga xos xromosoma tuzilmalari maqsadli ravishda bo'yaladi: konstitutsiyaviy heterokromatin (C-tasmalar), telomerik chiziqlar (T-tasmalar) va yadroviy tashkilotchining hududlari (NOR).

Karyotipdagi har bir alohida xromosomada ma'lum hududlarda xromosoma qo'llarining butun uzunligi bo'ylab joylashgan bir qator o'zgaruvchan chiziqlar (yorug'lik va qorong'i) mavjud. Chiziqlar va bo'limlar sentromeradan har bir elkaning telomerasiga yo'nalishda raqamlangan. Plotlar (mintaqalar) - ikkita qo'shni chiziqlar orasida joylashgan xromosomalarning segmentlari. Har qanday xromosomani belgilash uchun quyidagi qoidaga amal qilinadi - bu ko'rsatilgan:

1) xromosomalar soni;

2) kaldıraç belgisi (p va q);

3) uchastka (tuman) raqami;

4) ushbu bo'limdagi bo'lakning (yoki pastki qatorning) raqami. Yuqoridagi belgilarsiz tartibda yozilgan

bo'shliqlar va tinish belgilari.

Quyida ba'zi yozuvlar misollari keltirilgan:

46, XY, del (5) p12) - bu yozuv 5-xromosomaning qisqa qo'li, 1-hudud, 2-yo'lning o'chirilishiga ishora qiladi.

45, XY, rob (13; 21) (q10; q10) - bu holda qisqa yo'qotish bilan Robertson translokatsiyasi mavjudligini bildiradi.

qo'llar 13 va 21 xromosomalar; ikkala xromosomaning uzun qo'llarining 10-hududida (tsentromera mintaqasida) yorilish va birlashish sodir bo'ldi.

Mos 45, XO / 46, XX (r) - bu holda, aylana X xromosomali Shereshevskiy-Tyorner sindromida mozaiklik mavjud.

Sog'lik va kasallikdagi xromosoma anomaliyalarining nomenklaturasi va tasnifi bo'yicha batafsil ma'lumot Prokofieva-Belgovskaya A.A.ning nufuzli manbalarida keltirilgan. (1969), Vorsanova S.G. (2006) va "Odam sitogenetikasi bo'yicha xalqaro nomenklatura tizimi" (2005) xalqaro hujjatida.

3.5. XROMOSOMAL KASALLIKLARNI DAVOLASH

Xromosoma patologiyasini davolash asosan simptomatikdir. Bunday terapiyaning maqsadi aqliy zaiflik, o'sishning sekinlashishi, etarli darajada feminizatsiya yoki maskulinizatsiya, jinsiy bezlarning rivojlanmaganligi, turli xil suyak nuqsonlarini bartaraf etish yoki tuzatish va boshqalar kabi fenotipik ko'rinishlarni tuzatishdir. Buning uchun turli xil terapiya turlari, jumladan anabolik gormonlar, androgenlar va estrogenlar, gipofiz va qalqonsimon bez gormonlari, turli vitaminlar va umumiy toniklar qo'llaniladi. Jarrohlik, simptomatik davolash juda keng qo'llaniladi: kataraktni, oyoq yoki qo'lda qo'shimcha (oltinchi) barmoqni olib tashlash, to'liq bo'lmagan yuqori lab va / yoki tanglay uchun plastik jarrohlik, pilorik stenoz va tug'ma yurak nuqsonlarini bartaraf etish, turli xil kasalliklarni olib tashlash. o'smalar va boshqalar. Bu nuqsonlar ko'pincha 13, 18 va 21-xromosomalarda trisomiyalar, triploidiya, 4p va 5p sindromlari va boshqa xromosoma anomaliyalari bilan birga keladi. Simptomatik terapiyaning boshqa turlariga klimatoterapiya, balneoterapiya, elektroterapiyaning har xil turlari, termal terapiya va rentgen nurlanishi kiradi.

Xromosoma kasalliklarini davolashda ishlatiladigan simptomatik davolash usullarining xilma-xilligiga qaramay, ular hali ham davolab bo'lmaydi. Ushbu omilni hisobga olgan holda, hozirgi vaqtda asosiy e'tibor xromosoma anomaliyalari bo'lgan bolalar tug'ilishining oldini olishga qaratilgan.

3.6. XROMOSOMAL KASALLIKLARNING KLINIK XUSUSIYATLARI

Xromosoma kasalliklariga odamning somatik va jinsiy hujayralarida xromosomalar soni va tuzilishining buzilishi natijasida yuzaga keladigan tug'ma patologiyalar guruhi kiradi. Bunday anomaliyalarning umumiy populyatsiya chastotasi taxminan 1% ni tashkil qiladi. Qoida tariqasida, bu sporadik holatlar; xromosoma kasalliklarining aksariyati (90%) yangi mutatsiyalardan kelib chiqadi. Istisno - bu translokatsiya variantlari, ular muvozanatli ota-ona translokatsiyasining natijasidir.

3.6.1. Avtosomal sindromlar

Avtosomal sindromlarning umumiy xususiyatlariga o'tadigan bo'lsak, shuni esda tutish kerakki, har qanday autosomadagi barcha monosomiyalar odatda homilaning intrauterin o'limiga olib keladi. Monosomiya ko'pincha spontan abortlar materiallarida uchraydi. Avtosomalarning trisomiyasi bilan o'lim darajasi ancha past, ammo tug'ilgan bolalarda eng og'ir tug'ma nuqsonlar mavjud. Eng qulay holat tanadagi mozaiklik mavjudligida kuzatiladi. Mozaik karyotipi bo'lgan bolalarning hayotiyligi oshdi va ularning klinik ko'rinishi kamroq aniqlanadi. Raqamli xromosoma anomaliyalariga qo'shimcha ravishda, odamlarda ko'plab strukturaviy o'zgarishlar tasvirlangan.

Ma'lumki, avtosomal sindromli tirik tug'ilganlar orasida 13, 18 va 21-xromosomalarda to'liq trisomiyalar ko'pincha topiladi, ularning 75 foizi Daun sindromidir. Avtosomalar tomonidan boshqa to'liq trisomiyalardan 8, 9, 14 va 22-xromosomalarda tug'ilishning alohida holatlari qayd etilgan.

E'lon qilingan sana: 2015-09-18 | Ko'rishlar: 1009 | Mualliflik huquqining buzilishi

| 2 | | | | | | | | | | | |

Klinik genetika. E.F. Davydenkova, I.S. Liberman. Leningrad. "Dori". 1976 yil.

GENETIKA SOHADAGI Etakchi Mutaxassislar

Amelina Svetlana Sergeevna - Genetika va laboratoriya genetikasi kursi kafedrasi professori, tibbiyot fanlari doktori. Oliy malaka toifali genetik shifokor

Degtereva Elena Valentinovna - genetika va laboratoriya genetikasi kursi kafedrasi assistenti, birinchi toifali shifokor-genetik

Sahifa muharriri: Oksana Kryuchkova

Klinikada qo'llaniladigan sitogenetik usullarga turli to'qimalarning interfaza yadrolarida jinsiy xromatinni (X- va Y-xromatin) aniqlash, periferik qon neytrofillarida (baraban tayoqchalari) xromatinning morfologik xususiyatlarini, shuningdek, xromosomalarni o'rganish kiradi. karyotipni aniqlash uchun mitozning metafaza bosqichi.

Jinsiy xromatinni o'rganish

1949 yilda Barr va Bertram interfaza yadrolarida xromatinning jinsiy xromatin deb ataladigan quyuq rangli kichik tana shaklida ixcham to'planishini tasvirladilar. Odatda, bu ayollarda uchraydi, erkaklarda esa yo'q yoki kam miqdorda bo'ladi. Bitta X xromosomasi bo'lgan erkaklarda u doimo faol, ayollarda ikkita X xromosomadan faqat bittasi faol, ikkinchisi faol bo'lmagan, spirallashgan holatda. U ayol tanasining interfaza hujayra yadrosida aniqlangan jinsiy xromatin tanasini hosil qiladi. Og'iz bo'shlig'i shilliq qavatining smearlarida X-xromatinni asetoorsein bilan bo'yash bilan aniqlashning oddiy va tezkor usuli ishlab chiqilgan. Amalga oshirishning tezligi va qulayligi ushbu usulning tibbiy amaliyotda keng qo'llanilishiga olib keldi.

Hozirgacha bizning ixtiyorimizda bo'lgan usul faqat X-xromatinni, ya'ni inaktivatsiyalangan X-xromosomadan hosil bo'lgan xromatinni aniqladi. Tadqiqotlar nashr etilgandan beri Kaspersson va boshqalar. (1969, 1970), luminesans mikroskopik tekshirish yordamida Y-xromatinni aniqlash mumkin bo'ldi. Zech (1969) Y-xromosomaning uzun qoʻlining bir qismi akrikin xantal gazi bilan boʻyalganida lyuminestsatsiyalanishini koʻrsatdi. Keyin Pearson va boshqalar. (1970) erkak hujayralarining fazalararo yadrosida CUY karyotipli erkaklarda ikki baravar ko'payadigan F-tanasi deb ataladigan flüoresan tana borligini aniqladilar. Shunday qilib, paydo bo'ldi

klinik maqsadlarda qo'llanilishi mumkin bo'lgan so'zma-so'z parchalarda Y-xromatinni aniqlashning oddiy usuli. Bu populyatsiyani o'rganish uchun juda qulaydir, chunki to'liq karyotiplash murakkab va vaqt talab etadi.

Shunday qilib, hozirgi vaqtda X-xromatin va Y-kromatinni farqlash kerak.

X-xromatinni o'rganish. X-xromatinni tananing turli to'qimalarida aniqlash mumkin: teri hujayralarida, og'iz shilliq qavatida, siydik yo'lida, qin, qon hujayralarida, soch follikulasi hujayralarida, siydik cho'kmasining epitelial hujayralarida, amniotik suyuqlikda. , va hokazo o'limdan keyingi material, masalan, o'lik tug'ilgan bolalarning buyrak kanalchalari hujayralarida (N. P. Bochkov va boshq., 1966).

Eng keng tarqalgani bukkal smearlarda jinsiy xromatinni Sanderson va Styuart (1961) usulida bir vaqtning o'zida fiksatsiya va preparatlarni atsetoorsein bilan bo'yash bilan aniqlashdir.

Yonoqning ichki yuzasidan metall spatula bilan qirqish olinadi, shisha slaydga tekis qatlamda qo'llaniladi, bir tomchi sirka kislotasi atsetoorseinning 1,5% yoki 2% eritmasi bilan bo'yaladi. Bo'yoq eritmasi quyidagicha tayyorlanadi: 1,5-2 g orsein 45 ml muzli sirka kislotasida eritiladi; eritma bug'lar paydo bo'lguncha isitiladi, 55 ml distillangan suv qo'shiladi va sovutilgandan so'ng filtrlanadi. Keyin preparat qopqoq oynasi bilan qoplanadi, u ortiqcha bo'yoqni olib tashlash uchun 3-4 qatlamga o'ralgan doka yoki filtr qog'ozi orqali engil bosiladi. Preparatni tayyorlash uchun 2-3 daqiqa vaqt ketadi. Agar preparatlar darhol ko'rinmasa, qurib ketmaslik uchun qoplamaning chetlari kerosin bilan qoplangan. Ushbu shaklda preparatlar muzlatgichda 2 kungacha saqlanishi mumkin.

Asetoorcein X-xromatinni quyuq binafsha rangga va nukleoplazmani och pushti rangga bo'yadi.

X-xromatinni yanada kontrastli bo'yash uchun yoki atsetoorcein yo'q bo'lganda, laboratoriyamiz laboratoriyamiz xodimi A. M. Zaxarov tomonidan ishlab chiqilgan bo'yash usulidan muvaffaqiyatli foydalanadi. U heterokromatinni tiozin guruhining bo'yoqlari bilan metakromatik bo'yashga asoslangan: metilen ko'k, azure I. Mahalliy ishlab chiqarishning bu bo'yoqlari odatda har qanday laboratoriyada etarli miqdorda mavjud.

Yuqoridagi bo'yoqlardan birining distillangan suvdagi 0,2-0,5% li eritmasi ishlatiladi. Suyultirish 10 ml H20 uchun 20-50 mg bo'yoq tezligida amalga oshiriladi. Bitta preparatni tayyorlash uchun 2-3 tomchi eritma kerak bo'ladi. Eritmani bir necha tomchi fosfat buferi bilan pH 4,3-4,7 ga etkazish kerak. Buferdan foydalanish har doim ham kerak emas, chunki eritilganda bo'yoqning o'zi pH qiymatini kerakli qiymatga tushiradi. Preparatlarni tayyorlash aseto-orsein usuli bilan bir xil tarzda amalga oshiriladi.

Orsein usulidan farqli o'laroq, binoni bir vaqtning o'zida kislota bilan biriktirilmasdan amalga oshiriladi, bu ba'zi hujayralarning ajinlarini oldini oladi, shuning uchun hisoblanganda X-xromatin miqdori atseto bilan olingan miqdordan o'rtacha 5% ga oshadi. -orsein usuli. Bo'yashning bu usuli bilan epiteliy hujayralarining sitoplazmasi rangsiz bo'lib, yadrolari och binafsha rangga ega bo'ladi, jinsiy xromatin tanasi yanada kuchli bo'yalgan va qizg'ish rangga ega bo'ladi.

Jinsiy xromatinni hisoblash uchun immersion maqsadlarga ega MBI-3 yoki MBI-6 mikroskoplari qo'llaniladi. Yadro membranasiga qo'shni bo'lgan tekis konturli, silliq membrana va jinsiy xromatinli yadrolarni hisobga olgan holda, tahlil qilish uchun mos keladigan kamida 100 ta yadro hisoblanadi. Odatda tayyorgarlikning turli joylarida bir nechta ko'rish sohalari ko'rinadi.

X-xromatin jismlarining soniga qarab, X-xromosomalar sonini aniqlash mumkin. X xromosomalari soni har doim jinsiy xromatin tanalari sonidan bittaga ko'p bo'ladi.

So'nggi yillarda o'simta hujayralarida jinsiy xromatinni aniqlash keng tarqaldi. Bemorning jinsi va o'simtaning "hujayra qavati" o'rtasida nomuvofiqlik mavjud. Jinsiy xromatinning tarkibi va o'simtaning gormon terapiyasiga sezgirligi o'rtasida ham bog'liqlik mavjud.

Y-xromatinni o'rganish. Hujayra yadrolarida Y-xromatinni interfaza bosqichida aniqlash ftorxrom bo'yoqlari, masalan, akriqin yoki akriqin xantal, so'ngra luminesans mikroskopiya yordamida amalga oshirilishi mumkin. Shunday qilib, mitozning metafaza bosqichidagi xromosomalarni, shuningdek, hujayralar yadrolarida xromatinni aniqlash mumkin. Akrixin xantal metafazada Y xromosomasining uzun qo'llarining distal qismlarini bo'yadi. Bundan tashqari, kichik yumaloq floresan
interfaza yadrolarida kichik jismlar kuzatiladi. Ular erkaklarda uchraydi va Y-xromatin sifatida qaralishi mumkin. XYY tipidagi xromosoma anomaliyalarida Y-xromatinning ikkita tanasi kuzatiladi (5-rasm). Katta populyatsiya tadqiqotlari Y-xromatinni aniqlash uchun eng qulay ekanligini ko'rsatdi

Guruch. 5. 47, XYY sindromi bo'lgan bemorning interfaza yadrosida Y-xromatinning ikkita floresan tanasi.
Akrixin-xantal gazi bilan rang berish.

bukkal shilliq qavatning epitelial hujayralari va periferik qon limfotsitlari (Pearson va boshq., 1970; I'olani va Multon, 1971; Robinson, 1971).

F-xromatinning salomatlik va kasallikdagi xususiyatlari, yoshga bog'liq o'zgarishlar, tananing turli xil holati, metafaza Y-xromosomasining floresan qismining kattaligi bilan bog'liqligi va boshqalar intensiv o'rganilmoqda.

Spatula bilan olingan bukkal shilliq qavatning epiteliysini qirib tashlash qopqoq yoki mikroskop slaydlarida tekis qatlamda qo'llaniladi. Quritilgan surtmalar 2 minut davomida mutlaq metil spirtida fiksatsiyalanadi, so‘ngra har birida 30 soniya ushlab turuvchi spirtlar (etil spirti) qatoridan suvga o‘tkaziladi. Smear McIlwain's buferiga (pH 7,0) 8 daqiqa davomida 8 ° da joylashtiriladi. Smearlar 0,005% li akrikin-xantal gaz eritmasida 8-10 daqiqa davomida bo'yaladi. Keyin preparatlar toza musluk suvida yuviladi va Makilveynning sitrat-fosfat tamponining ikki-uch bo'lagida 1-2 daqiqa davomida ajratiladi va suv-glitserin aralashmasiga (1: 1) qo'shiladi. Ortiqcha muhit filtr qog'ozi bilan ehtiyotkorlik bilan chiqariladi va qopqoq oynasining chetlari kerosin bilan qoplanadi.

Preparatlar floresan mikroskop ostida tahlil qilinadi (ML-2 yoki ML-3, FS-2 va CC-2 filtrli DRSH 250 chiroq va ZhS 18 + ZhZS 19 to'siq filtri).

Literal epiteliy hujayralarining yadrolarida U-xromatin yadroning qolgan xromatinining o'rtacha lyuminesans fonida yorqin nurli jismlar shaklida topiladi. Y-xromatinli hujayralarning umumiy soni 33 dan 92% gacha. Yagona U-xromatin tanasining o'lchami diametri taxminan 0,25-0,8 mkm. Ammo Y-xromatin yadroda bir, ikki, uch yoki undan ortiq mayda bo'laklar shaklida taqdim etilishi mumkin. Interfaza Y xromatini metafaza plitalaridagi Y xromosomalarining lyuminestsent hududlari hajmining o'zgarishi bilan bog'liq.

Y-xromatinni luminesans-mikroskopik usulda X-xromatinini aniqlash usuli bilan birgalikda oʻrganish karyotiplashsiz jinsiy xromosomalar toʻplamini aniqlash imkonini beradi. Endoservikal smearlarni lyuminestsent texnika yordamida tekshirish prenatal jinsni aniqlash uchun ishlatilishi mumkin.